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文檔簡介
1、背景與目的
生物節(jié)律是生物體在進化過程中為抵御大自然環(huán)境而逐漸形成機體內(nèi)在與大自然環(huán)境周期性變化相適應(yīng)的生物節(jié)律。生物節(jié)律的中樞起搏點位于下丘腦視交叉上核,該核團將接收到的信號通過調(diào)節(jié)激素及體液等進而將信號傳輸?shù)酵庵芙M織如肝、腎、脾等,從而使外周組織呈節(jié)律性震蕩。近年來有研究表明生物節(jié)律在抗腫瘤治療、調(diào)節(jié)睡眠以及提高航天員工作績效方面有重要作用。本研究通過在全黑環(huán)境條件下對C57小鼠進行后肢去負荷運動(模擬微重力的尾吊)的方法
2、,檢測小鼠血漿中褪黑素與皮質(zhì)酮激素水平及肝臟組織中節(jié)律基因clock、bmal1、per1、per2、cry1、cry2的變化,探究生物節(jié)律與微重力的關(guān)聯(lián)性。
方法
常規(guī)明暗光照條件導(dǎo)引C57小鼠一周后,在持續(xù)黑暗條件下采用頭低位-30度法尾吊C57小鼠,在尾吊小鼠第12天、13天、14天每隔4小時連續(xù)18個時間點進行血漿與肝臟組織取材。選取外周血血漿采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測褪黑素與皮質(zhì)酮激素濃度,選取肝
3、臟組織提取總RNA,用Real-time PCR法檢測節(jié)律基因(clock、bmal1、per1、per2、cry1、cry2) mRNA的相對表達水平。
結(jié)果
(1)全黑環(huán)境條件下,C57小鼠尾吊組與對照組血漿中褪黑素與皮質(zhì)酮激素濃度無顯著性差異(P>0.05)。
(2)尾吊組與對照組肝臟組織中clock與bmal1節(jié)律基因mRNA水平均呈現(xiàn)出節(jié)律性表達特征。在尾吊條件下,clock基因mRNA的峰值相位
4、提前約4 h,bmal1基因mRNA表達節(jié)律的振幅在每天授時因子時間ZT2(Zeitgeber Time)與ZT6顯著下降(P<0.05)。
(3)尾吊組與對照組肝臟中 per1與 per2節(jié)律基因的mRNA表達峰值均為約下午14-18時,谷值約為上午10時。
(4)尾吊組與對照組肝臟中cry1與cry2節(jié)律基因的mRNA的表達水平呈現(xiàn)相同的趨勢。峰值均約為午后14時,谷值約為早晨6時。
結(jié)論
在
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