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文檔簡介
1、目的:研究丹酚酸 A、C配伍對人血清白蛋白誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞過程中炎癥因子及氧化應(yīng)激反應(yīng)的影響。
方法:人腎小管上皮細(xì)胞于體外培養(yǎng),隨機(jī)分成5個(gè)組:正常組、人血清白蛋白組(即模型組)、藥物治療組包括丹酚酸A組、丹酚酸C組、丹酚酸A+C組(丹酚酸A和C組分按1:1加入)。無血清培養(yǎng)液同步化24小時(shí)后,除正常組外,其余組分別加入 HSA干預(yù)24h、48h、72h,各治療組同時(shí)加入藥物治療。ELISA檢測MCP-1、CCL7、IP-
2、10表達(dá)情況。細(xì)胞免疫熒光技術(shù)定位檢測MCP-1、IP-10。Western Blot檢測M-CSF。應(yīng)用水溶性四唑鹽法(WST-1法)檢測細(xì)胞SOD活力,應(yīng)用二法硫雙硝基苯甲酸法(DTNB法)檢測細(xì)胞 GSH含量,應(yīng)用硫代巴比妥酸法(TBA法)測定細(xì)胞MDA含量。
結(jié)果:1.MCP-1、CCL7、IP-10的檢測結(jié)果1)ELISA檢測結(jié)果與相對應(yīng)時(shí)間點(diǎn)模型組比較,24h、48h、72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)各給藥組MCP-1、CCL7、
3、IP-10的相對表達(dá)量減少(P<0.01)。各給藥組之間相對應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較,24h、48h、72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)丹酚酸A+C組MCP-1、CCL7、IP-10的相對表達(dá)量均較丹酚酸A組、丹酚酸C組MCP-1相對表達(dá)量降低(P<0.01)。2)MCP-1和IP-10陽性表達(dá)為綠色熒光,表達(dá)部位主要位于人腎小管上皮細(xì)胞的胞質(zhì)。
2.M-CSF檢測結(jié)果與相對應(yīng)時(shí)間點(diǎn)模型組比較,24h、48h兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)各給藥組M-CSF相對表達(dá)量減少(P<
4、0.05),72h時(shí)間點(diǎn)丹酚酸C組和A+C組M-CSF相對表達(dá)量較模型組減少(P<0.05)。24h、48h、72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)丹酚酸A+C組M-CSF的相對表達(dá)量均較丹酚酸A組、丹酚酸C組降低(P<0.05)。
3.SOD、GSH、MDA檢測結(jié)果與相對應(yīng)時(shí)間點(diǎn)正常組比較,24h、48h、72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)模型組細(xì)胞SOD活力和GSH含量相對降低(P<0.05)。與相對應(yīng)時(shí)間點(diǎn)模型組比較,24h、48h、72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)各給藥組S
5、OD活力和GSH含量增高(P<0.05)。各給藥組之間相對應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較,24h、48h、72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)丹酚酸 A+C組SOD活力和GSH含量均較丹酚酸A組、丹酚酸C組增高(P<0.05)。與相對應(yīng)時(shí)間點(diǎn)模型組比較,24h、48h、72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)各給藥組MDA的含量減少(P<0.05)。各給藥組之間相對應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較,24h、48h、72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)丹酚酸A+C組MDA的含量低于丹酚酸A組和丹酚酸C組(P<0.05)。
結(jié)論:
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