TG2抑制劑在減輕大鼠肺動(dòng)脈高壓肺血管重構(gòu)中的作用機(jī)制.pdf

1、目的：探討TG2抑制劑在減輕大鼠肺動(dòng)脈高壓肺血管重構(gòu)中的作用機(jī)制。
　　方法：
　　1、采用左肺切除加野百合堿注射建立大鼠肺動(dòng)脈高壓模型，利用TG2抑制劑─胱胺二鹽酸，抑制肺動(dòng)脈高壓肺血管重構(gòu)。
　　2、將30只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為3組（每組10只），即空白對(duì)照組：不做任何處理，同其他兩組大鼠相同環(huán)境下飼養(yǎng)；模型組：左肺切除術(shù)7d后野百合堿（MCT,60mg/kg）項(xiàng)背部皮下注射；干預(yù)組：在模型組基礎(chǔ)上，于左肺切除

2、術(shù)5d后，每日腹腔注射胱胺二鹽酸（112mg/kg）持續(xù)至實(shí)驗(yàn)35d。
　　3、各組大鼠在實(shí)驗(yàn)35d后，測(cè)定平均肺動(dòng)脈壓力（mPAP），計(jì)算右心肥厚指數(shù)（RVHI），即右心室游離壁（RV）與左心室+室間隔（LV+S）之比，即RV/(LV+S)。
　　4、將各組大鼠肺組織做HE染色、肺彈力纖維染色，觀察肺血管及肺組織的病理改變，計(jì)算肺小動(dòng)脈中膜厚度百分比（WT％）、肺小動(dòng)脈管壁面積與血管總面積比值（WA%）、肺小動(dòng)脈新生內(nèi)膜增

3、殖度等指標(biāo)。
　　5、采用RT-PCR測(cè)定各組大鼠肺組織中Akt mRNA相對(duì)表達(dá)水平。
　　6、采用蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western blot)測(cè)定各組大鼠Akt和p-Akt蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1、與對(duì)照組比較，采用左肺切除加野百合堿注射的模型組大鼠形成了嚴(yán)重的肺動(dòng)脈高壓及右心室肥大，并有新生內(nèi)膜形成，mPAP、右心肥厚指數(shù)百分比（RVHI%）、肺小動(dòng)脈中膜厚度百分比（WT％）、肺小動(dòng)脈管壁面積與血

4、管總面積比值（WA%）及新生內(nèi)膜增殖度百分比均明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　2、采用胱胺二鹽酸干預(yù)后，干預(yù)組mPAP、右心肥厚指數(shù)百分比（RVHI%)、肺小動(dòng)脈中膜厚度百分比（WT％）、肺小動(dòng)脈管壁面積與血管總面積比值（WA%）及新生內(nèi)膜增殖度百分比較模型組均有不同程度的降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　3、RT-PCR結(jié)果顯示模型組Akt mRNA的表達(dá)水平較對(duì)照組有增高，差異有統(tǒng)

5、計(jì)學(xué)意義（p<0.05），Western blot結(jié)果顯示模型組肺組織Akt和p-Akt蛋白表達(dá)水平較對(duì)照組亦有增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。采用胱胺二鹽酸干預(yù)后，干預(yù)組Akt mRNA的表達(dá)水平、Akt和p-Akt蛋白表達(dá)量較模型組均有不同程度的下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、左肺切除+野百合堿注射成功建立大鼠肺動(dòng)脈高壓模型，并形成了新生內(nèi)膜及典型病理學(xué)特征─肺血管重構(gòu)。