賴氨匹林對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞的抑制作用及其機(jī)制.pdf

1、目的：研究非選擇性環(huán)氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）抑制劑賴氨匹林(aspisol)對(duì)人宮頸癌 hela細(xì)胞增殖、凋亡的調(diào)控作用及其細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase，ERK1/2)信號(hào)通路的影響。探討aspisol抗宮頸癌作用的可能機(jī)制，為拓寬aspisol的臨床應(yīng)用范圍提供實(shí)驗(yàn)佐證和理論依據(jù)。
　　方法：實(shí)驗(yàn)分為陰性對(duì)照組、aspiso

2、l組（1、5、10 mmol?L-1）組和陽(yáng)性藥組（U012610μmol?L-1）共五組。1、生長(zhǎng)曲線測(cè)定及MTT比色法分析aspisol對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞的抑制作用；2、標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞集落形成分析法測(cè)定aspisol對(duì)Hela細(xì)胞的細(xì)胞集落（克?。┬纬傻挠绊懀?、HE染色觀察aspisol作用于人宮頸癌細(xì)胞Hela細(xì)胞后形態(tài)學(xué)的改變；4、流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合Annexin V/PI雙染測(cè)定Hela細(xì)胞早期凋亡率；5、Western blot

3、方法檢測(cè)ERK1/2、P-ERK1/2和COX-2蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、aspisol各組均可抑制Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)，其作用具有濃度和時(shí)間依賴性，與對(duì)照組相比差異有顯著性(P<0.01)，aspisol10 mmol?L-1的濃度抑制率最大，在作用于Hela細(xì)胞72小時(shí)后抑制率可達(dá)到(59.1±3.14)％；
　　2、集落形成數(shù)量在 aspisol各用藥組與陰性對(duì)照組相比依次降低到(96.22±0.18)%

4、、(73.02±1.35)%、(48.17±2.05)%，aspiso（l mmol?L-1）與陰性對(duì)照組比較，差異無(wú)顯著性（P>0.05），aspisol（5、10 mmol?L-1）與陰性對(duì)照組比較，差異有顯著性（P<0.05）；
　　3、HE染色光鏡下見(jiàn)aspisol各組與陰性對(duì)照組相比細(xì)胞密度減小，細(xì)胞變圓，胞核染色變淺；
　　4、aspisol各組作用24 h后誘導(dǎo)Hela細(xì)胞早期凋亡率分別為(5.74±0.87)

5、%、(13.01±1.85)%、(23.42±3.12)%，aspiso（l mmol?L-1）與陰性對(duì)照組(0.46±0.69)%比較，差異無(wú)顯著性（P>0.05），aspisol(5、10 mmol?L-1)與陰性對(duì)照組比較，差異有顯著性(P<0.01)，并呈濃度依賴性；
　　5、aspisol可以下調(diào)P-ERK1/2及COX-2的表達(dá)水平(P<0.01)，但不影響總ERK表達(dá)(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1

6、、aspisol可以抑制宮頸癌Hela細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)其凋亡；
　　2、Hela細(xì)胞中ERK1/2表達(dá)增多，aspisol呈濃度依賴性抑制Hela細(xì)胞ERK1/2活性；
　　3、Hela細(xì)胞中COX-2表達(dá)增高，aspisol呈濃度依賴性抑制Hela細(xì)胞COX-2表達(dá)；
　　4、Aspisol抑制Hela細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)凋亡作用的機(jī)制可能與抑制ERK1/2的活化、進(jìn)而下調(diào)COX-2的表達(dá)有關(guān)。
　　本文工作的主要?jiǎng)?chuàng)