BTB基因家族成員BTBD8、KLHL7和KLHL9的克隆和功能研究.pdf

1、BTB結構域和kelch結構域都是在進化上高度保守的結構域，廣泛存在于從酵母到人類的各種物種中。在人類基因組中發(fā)現(xiàn)了很多BTB/kelch蛋白，提示這類蛋白功能的重要性和多樣性?，F(xiàn)在越來越多的實驗證據(jù)證明BTB/kelch蛋白在胞質分裂、細胞骨架功能維持、細胞周期調控、腫瘤發(fā)生、神經發(fā)育等重要生理過程中都起了重要的作用。BTB結構域的主要功能是介導蛋白相互作用，它在PLZF和BCL6等轉錄因子的轉錄調控和參與Cul3介導的泛素途徑中都有

2、重要作用。kelch蛋白是近年來發(fā)現(xiàn)的一類新的細胞骨架結合蛋白，可以與actin細胞骨架作用從而對細胞骨架功能進行調控。更多的研究表明kelch結構域的功能多樣化，參與了一系列重要的信號傳導途徑，在細胞周期調控和腫瘤發(fā)生中都發(fā)揮了重要作用。 　　從本實驗室的高質量人胎腦文庫中克隆得到了三個含有BTB結構域的新成員：BTBD8、KLHL7和KLHL9，并且KLHL7和KLHL9同時含有kelch-repeat結構域。通過信息學分析發(fā)現(xiàn)我

3、們得到的BTBD8、KLHL7和KLHL9的cDNA均為全長形式，它們分別編碼含有305個氨基酸、538個氨基酸和617個氨基酸的蛋白，并且都含有保守的BTB結構域和kelch結構域。通過Northern雜交、RT-PCR和原位雜交等實驗，發(fā)現(xiàn)了它們各自特異的表達譜模式。利用免疫共沉淀實驗確定了KLHL7和KLHL9都能與actin結合，提示KLHL7和KLHL9可能在維持細胞骨架功能和參與骨架信號傳導中有重要作用。 　　利用酵母雙雜