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1、本文采用透明圈平板篩選、單因子及多因子正交試驗(yàn)、超濾濃縮、Sephadex G-100凝膠層析、SDS-PAGE等方法,從現(xiàn)有菌種資源篩選出一個(gè)產(chǎn)木聚糖酶菌株,并對(duì)該菌株的適宜發(fā)酵條件、產(chǎn)酶規(guī)律、分離純化方法和酶學(xué)特性進(jìn)行了初步研究,得到電泳純木聚糖酶樣品,為木聚糖酶的工業(yè)化生產(chǎn)和應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)得出以下結(jié)論: 1、從現(xiàn)有菌種資源中篩選出1個(gè)高產(chǎn)木聚糖酶的Erwinia carotovora變異菌株,編號(hào)為CXJZ
2、11-01。 2、獲得該菌株適宜生長(zhǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)基最佳配方,以蛋白胨作為該菌株發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源,發(fā)酵8.0h即出現(xiàn)產(chǎn)酶高峰,發(fā)酵液酶活達(dá)到344U/ml。 3、變異菌株CXJZ11-01所產(chǎn)木聚糖酶最佳測(cè)定體系:0.1mol/L檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液;pH5.8;以木聚糖為底物,濃度0.8﹪;溫度60℃;DNS量2.0ml~2.5ml;顯色時(shí)間5min;測(cè)定波長(zhǎng)540nm。 4、變異菌株CXJXZ11.01所產(chǎn)木聚
3、糖酶優(yōu)化分離條件為:50kD、10kD、5kD膜包超濾濃縮及Sephadex G-100凝膠層析。木聚糖酶的純化倍數(shù)為13.25,收率為45.4﹪,通過(guò)SDS-PAGE得到單一條帶,測(cè)定其分子量為29.3kD。 5、變異菌株CXJZ11-01所產(chǎn)木聚糖酶的酶學(xué)性質(zhì)為:穩(wěn)定pH范圍3.4~6.4,作用pH范圍4.0~7.0,最適pH5.8;熱穩(wěn)定溫度在60℃以下,適宜溫度范圍是35℃~60℃;Fe<'2+>、Co<'2+>和Mn<
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