利用多重PCR技術(shù)進(jìn)行小麥高分子量麥谷蛋白亞基分子標(biāo)記輔助選擇.pdf

1、小麥的加工品質(zhì)與小麥麥谷蛋白的組成和含量密切相關(guān)，特別是與由Glu-1位點(diǎn)編碼的 HMW-GS的組成和含量。其中，1Ax2<'*>、1Axl、1Bx17+lBy18、1Bx14+lBy15、1Bx7+1By8、 1Bx7<'OE>(over-expression)和1Dx5+1Dy10亞基與好的加工品質(zhì)相關(guān)，而1AxN、1Bx6、1Bx20和1Dx2+lDy12亞基與較差的加工品質(zhì)相關(guān)。為了改良小麥品質(zhì)，以上亞基特別是x-型亞基的特異的

2、分子標(biāo)記已經(jīng)被建立并應(yīng)用于品質(zhì)改良的分子育種。基于傳統(tǒng)的鑒定HMW-GS的SDS-PAGE方法和新近發(fā)展起來的基于DNA的PCR分析的等位基因特異的分子標(biāo)記，我們建立了一次反應(yīng)能夠同時(shí)鑒定多個(gè)HMW-GS的多重PCR的體系。我們以1Ax2<'*>+1Bx7<'OE>+1Dx5的亞基組合摸索了PCR反應(yīng)組分和循環(huán)參數(shù)對多重PCR反應(yīng)結(jié)果的影響，其中引物濃度比例和Tm值是關(guān)鍵因素。然后，我們對不同的HMW-GS組合進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增，總共得

3、到了5種二重PCR組合：1Ax2<'*>+1Dx5、1Bx14+lDx5、1Ax1+lDx5、IBx7+1Dx5和1Ax2<'*>+1Bx7，6種三重PCR組合：1Ax2<'*>+1Bx7+1Dx5、1Ax1+1Bx7+1Dx5、 1Axl+1Bx17+1Dx5、1Ax1+IBx14+1Dx5、1Ax2*+1Bx14+1Dx5和1Ax2*+1Bx7<'OE>+1Dx5。這些不同的HMW-GS的多重PCR體系的建立可以快速高效的鑒定多個(gè)H