瑪咖酰胺的提取分離及其緩解體力疲勞活性的研究.pdf

1、瑪咖酰胺是瑪咖中特有的活性成分，具有緩解體力疲勞的功效。由于瑪咖酰胺含量較少，且缺乏系統(tǒng)的提取分離工藝，目前關(guān)于瑪咖酰胺緩解體力疲勞的研究主要集中在活性驗(yàn)證層面上。因此，本研究以瑪咖塊根為原料，通過(guò)酶輔助提取制備瑪咖酰胺粗提物，再通過(guò)大孔樹脂進(jìn)行分離，最后研究獲得的兩種瑪咖酰胺提取物緩解體力疲勞的活性并對(duì)其機(jī)理進(jìn)行簡(jiǎn)單解析，為后續(xù)深入研究瑪咖的抗疲勞機(jī)制提供科學(xué)依據(jù)。本論文的主要研究結(jié)果匯總?cè)缦?
　　(1)以總瑪咖酰胺含量為指標(biāo)

2、，用響應(yīng)面法優(yōu)化酶輔助回流提取總瑪咖酰胺的工藝。最佳工藝參數(shù)為:瑪咖粉在纖維素酶添加量為1.5％，溫度50℃，pH=4.5檸檬酸溶液中（瑪咖粉與檸檬酸溶液料液比為1∶4，w/v）預(yù)處理2h后，按1∶16料液比加入95％乙醇，在70℃條件下回流提取2次，每次2.8h。按此工藝條件提取的總瑪咖酰胺含量為2.12mg/g。
　　(2)通過(guò)比較四種大孔樹脂對(duì)瑪咖酰胺吸附和解吸能力，得X-5大孔樹脂最適合用于瑪咖酰胺粗提物的分離?，斂０反?/p>

3、提取物經(jīng)X-5樹脂分離的最佳工藝為:100mL質(zhì)量濃度為0.212mg/mL的粗提物，以2mL/min上樣流速，上樣至柱體積為50mL的大孔樹脂柱（約20g樹脂，即1g樹脂能吸附5mL質(zhì)量濃度為0.212mg/mL的樣液），靜置吸附3.5h。先用水洗至洗脫液無(wú)色后，再用140mL90％乙醇（1g樹脂需要7mL洗脫液），以2mL/min的洗脫流速進(jìn)行洗脫。收集洗脫液，經(jīng)濃縮回收溶劑，冷凍干燥，得浸膏中總酰胺含量為17.09mg/g。

4、>　　(3)瑪咖酰胺粗提取物(CME)和經(jīng)分離后的瑪咖酰胺提取物(PME)均具有顯著的緩解體力疲勞效果，且PME的效果比CME的好。表現(xiàn)為:CME各劑量組比正常組游泳時(shí)間延長(zhǎng)49.5-77.6％，而PME組則延長(zhǎng)95.6-137.5％;PME各組游泳時(shí)間比陽(yáng)性對(duì)照組顯著延長(zhǎng)44.8-75.9％，CME低劑量組與陽(yáng)性對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。且PME高劑量組游泳時(shí)間比CME低劑量組顯著延長(zhǎng)了58.8％。與陽(yáng)性對(duì)照比，只有高劑量PME組肝糖原和肌

5、糖原分別顯著提高18.8％和25.2％;BLA顯著降低7.26％;兩種化合物對(duì)BUN效果均不好。CME和PME各劑量組，均比正常組顯著降低運(yùn)動(dòng)后小鼠血清中LDH(8.10-20.04％)，CK(15.29-42.68％)、和NEFA(12.95-23.2％)的水平，且骨骼肌和心肌損傷程度均比正常組和陽(yáng)性對(duì)照組表現(xiàn)輕微。這兩種瑪咖酰胺提取物緩解體力疲勞的機(jī)制可能在于調(diào)節(jié)運(yùn)動(dòng)中能量代謝過(guò)程，加速脂肪酸的氧化供能，減輕運(yùn)動(dòng)中對(duì)骨骼肌和心肌細(xì)胞