脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：建立兔脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的體外分離培養(yǎng)方法，鑒定并分析其生物學(xué)特性，并探索脂肪組織來(lái)源干細(xì)胞體外培養(yǎng)的最佳條件。 方法：選用新西蘭大白兔，無(wú)菌取出腹股溝脂肪，膠原酶法分離出兔脂肪干細(xì)胞，并進(jìn)行體外培養(yǎng)，取2代以後的兔脂肪干細(xì)胞觀察其形態(tài)特徵，并繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線及倍增時(shí)間。比較了不同膠原酶濃度、膠原酶消化時(shí)間和血清濃度對(duì)於脂肪來(lái)源干細(xì)胞體外培養(yǎng)的不同效果。 結(jié)果：①兔脂肪干細(xì)胞原代及傳代細(xì)胞形態(tài)：原代及傳代的兔脂肪干細(xì)

2、胞均呈長(zhǎng)梭形或多邊形貼壁生長(zhǎng)，生長(zhǎng)分化活躍。②兔脂肪干細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線及倍增時(shí)間：傳代的兔脂肪干細(xì)胞生長(zhǎng)曲線呈“s”形，倍增時(shí)間為55h。③兔脂肪干細(xì)胞的成脂分化誘導(dǎo)，經(jīng)油紅染色的辦法，其成脂分化的陽(yáng)性率為65％④采用0.5mg/ml、1mg/ml、1.5mg/ml 、2mg/ml四種不同膠原酶濃度進(jìn)行消化後發(fā)現(xiàn)，在消化時(shí)間為1h時(shí)，2mg/ml組細(xì)胞總數(shù)最多，活細(xì)胞比率與其他組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在消化時(shí)間為2h時(shí)，細(xì)胞總數(shù)較1h各組均增加，