白介素-17在頸動脈粥樣硬化性狹窄動物模型中的表達.pdf

1、腦血管病已成為危害健康的主要疾病之一，約20％-30％缺血性腦血管病與頸動脈粥樣硬化性狹窄有關。為了對頸動脈粥樣硬化進行研究，必須有可靠的動物模型。研究證實豬的動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展，與人極其相似，小型豬又具有飼養(yǎng)方便、體積小、易管理的特點，故本實驗應用中國小型豬作為動物模型載體，采用頸動脈球囊擴張+高脂飼養(yǎng)方法，制作頸動脈粥樣硬化狹窄動物模型。并通過多普勒超聲、血管病理觀察頸動脈粥樣硬化的各項指標，如動脈狹窄程度、粥樣斑塊的性質、病理特

2、征、血流動力學等指標，驗證該模型基本符合人體動脈粥樣硬化病理過程及特點。
　　 白介素-17(Interleukin-17，IL-17)是新近發(fā)現(xiàn)的一種促炎癥性細胞因子，是一種155個氨基酸的糖蛋白。IL-17來源于活化的記憶性CD4+T淋巴細胞，并與特異性受體相結合，從而促進炎癥反應、調節(jié)免疫應答、造血等多種功能。IL-17與數(shù)種慢性炎性和自身免疫性疾病密切相關，但是，IL-17在動脈粥樣硬化各個階段所起作用剛開始進行研究。I

3、L-17在動脈粥樣硬化損害發(fā)展過程中起的作用是非常重要并有一定爭議。一些研究發(fā)現(xiàn)IL-17對防止動脈粥樣硬化有保護作用，另一些近期研究發(fā)現(xiàn)IL-17可導致動脈粥樣硬化。因此，IL-17的功能存在爭議，有待更多的研究進一步詮釋。
　　 第一部分頸動脈粥樣硬化狹窄模型的建立
　　 目的：建立小型豬頸動脈粥樣硬化狹窄動物模型
　　 方法：應用小型豬7頭，進行普通飼料喂養(yǎng)1周后，對照組1頭繼續(xù)普通飼料喂養(yǎng)；實驗組6頭小型

4、豬在氯胺酮麻醉下，對其右側頸動脈進行球囊擴張，術后給予高脂飼料喂養(yǎng)，分別在損傷后2周、4周、8周、12周，經(jīng)前腔靜脈抽血化驗：血甘油三酯、膽固醇含量，并通過多普勒超聲觀察損傷處血管的血管狹窄程度、粥樣斑塊大小、性質、血流速度、內膜增厚程度，并與術前進行比較。12周后處死小型豬，解剖其頸動脈，觀察損傷處血管病理改變。
　　 結果：
　　 1、超聲顯示6頭小型豬球囊擴張一側(右側)均出現(xiàn)動脈粥樣硬化超聲改變并血管狹窄。PSV

5、、EDV均較造模前顯著增高，血管管腔面積較造模前顯著變小，并且可見不同類型的粥樣斑塊。而球囊擴張對側頸動脈內徑造模前后無明顯差異性，此為比較的實驗基礎。
　　 2、術后血甘油三酯、膽固醇測定結果均較術前顯著增高(p<0.05)。甘油三酯在2周時增高最明顯。
　　 3、病理顯示：球囊擴張側血管呈現(xiàn)明顯的動脈粥樣硬化改變，內膜廣泛增厚，可見大量泡沫細胞，可見新生血管，中膜平滑肌斷裂、壞死，肌層變薄，廣泛炎細胞浸潤。而未進行擴

6、張側頸動脈經(jīng)過高脂飼養(yǎng)也可見輕度內膜增厚，其余結構未見明顯異常。
　　 結論：
　　 應用球囊損傷+高脂飼養(yǎng)方法可成功建立小型豬頸動脈粥樣硬化狹窄的動物模型。通過超聲和病理觀察，證實該模型且基本符合人類頸動脈粥樣硬化的各個階段的基本特點，并有一定程度的狹窄，可用于頸動脈粥樣硬化狹窄研究的可靠動物模型。
　　 第二部分白介素-17在頸動脈粥樣硬化狹窄模型中的表達
　　 目的：觀察白介素-17在頸動脈各層如內

7、膜、平滑肌、粥樣斑塊中的表達，并探討其作用機制。
　　 方法：采用免疫熒光染色技術對所取標本進行染色，照片，觀察IL-17在損傷側動脈及未損傷側動脈管壁(包括內膜、中層平滑肌、斑塊、外膜)的分布情況，進行分析總結。
　　 結果：免疫熒光顯示在損傷側動脈粥樣硬化明顯處，IL-17抗體聚集，在粥樣硬化斑塊中表現(xiàn)明顯，而內膜及中層平滑肌層IL-17表達較少；在未損傷側頸動脈IL-17抗體聚集較少。
　　 結論：

8、　　 在動脈粥樣硬化過程中，IL-17作為致炎性因子，參與動脈粥樣硬化形成、發(fā)展，尤其在粥樣斑塊形成中起重要作用，并與斑塊穩(wěn)定性有關。但IL-17發(fā)揮上述作用的機制仍不明確，需進一步研究闡明。
　　 全文結論：
　　 1、應用球囊損傷+高脂飼養(yǎng)方法可成功建立小型豬頸動脈粥樣硬化狹窄的動物模型。通過超聲及病理觀察，證實該模型且基本符合人類頸動脈粥樣硬化的各個階段的基本特點，并有一定程度的狹窄，可作為頸動脈粥樣硬化研究可靠