銅綠假單胞菌CdpR對(duì)致病因子的調(diào)控途徑及其功能的研究.pdf

1、銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）是人類的一種機(jī)會(huì)致病菌，在患者免疫力低下時(shí)，常?？梢砸鸺甭愿腥?，從而對(duì)人類生命造成威脅。群體感應(yīng)(Quorum sensing，QS)系統(tǒng)控制著銅綠假單胞菌中大量毒力因子的表達(dá)，從而構(gòu)成一個(gè)非常復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，但是其中詳細(xì)的調(diào)控機(jī)制還沒有被完全的闡明。另外，參與蛋白降解過程的ATP依賴型蛋白酶ClpAP被認(rèn)為與銅綠假單胞菌中一系列代謝途徑有關(guān)，但是該蛋白酶在代謝過程中的作用

2、基質(zhì)和分子機(jī)制卻不是完全清楚。
　　在早前的研究中，發(fā)現(xiàn)群體感應(yīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)子VqsM可以直接結(jié)合在PA2588基因的啟動(dòng)子區(qū)域?？紤]到lasI和PA2588的表達(dá)都受到VqsM的直接調(diào)控，設(shè)想PA2588蛋白是否也可以調(diào)控與銅綠假單胞菌群體感應(yīng)系統(tǒng)有關(guān)的毒力因子。利用基因敲除的方法構(gòu)建了PA2588的基因敲除突變體，并發(fā)現(xiàn)該基因的缺失，會(huì)增加綠膿菌素的產(chǎn)量和生物膜的形成。為了對(duì)PA2588蛋白的功能有更加深入的了解，通過ChIP-s

3、eq分析實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)PA2588蛋白直接結(jié)合在pqsH基因的啟動(dòng)子區(qū)域，此區(qū)域編碼了銅綠假單胞菌群體感應(yīng)系統(tǒng)喹諾酮信號(hào)的主要合成酶PqsH。還發(fā)現(xiàn)PA2588蛋白的C-末端結(jié)構(gòu)域與其他AraC蛋白家族成員的DNA結(jié)合區(qū)域相類似，通過對(duì)其結(jié)構(gòu)的進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)PA2588蛋白在N-末端區(qū)域有一個(gè)新穎的褶皺，同時(shí)它的C-末端的HTH區(qū)域也是一個(gè)特殊的DNA識(shí)別區(qū)域。另外，還證明了銜接蛋白ClpS會(huì)在PA2588蛋白被遞送到ATP依賴型蛋白酶Cl