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文檔簡介
1、中國農(nóng)業(yè)科學研究院碩士學位論文美洲商陸抗病毒蛋白基因的表達和遺傳轉化的研究姓名:韓政申請學位級別:碩士專業(yè):生物化學與分子生物學指導教師:蘇金王錫鋒20040601ABSTRACTIthasbeenrevealedthatPokeweedAntiviralProtein(PAP)caninhibittheinfectionofmanyplantvirusesSoitcanbeusedtocontrolplantviraldiseaseT
2、hestudiesincludetwopansInthefirstpart,cultivationconditionssuchascarbonsources,inoculationration,methanolconcentration,pH,Dbiotinconcentration,shakingspeedandinducedtimewerestudiedInfurtherresearch,thefermentationstrateg
3、ywasoptimizedbyorthogonaloperationandabetterstrategytoproducePAPwasobtainedSDS—PAGEresultsshowedthatthefinalPAPconcentrationswere45mg/LWesternblottingshowedthattheproteincouldspeciallyreactwithPAPantiserumActivitytestsre
4、vealedthattheproteincouldinhibitTMVinfectionwithhi曲efficiencyInthesecondpart,PAPgenewastransferredintoPetuniahybridainordertoobtaintransgenicplantsthatcancontroltheinfectionofsomeplantvirusesAtfirsttheplantexpressionvect
5、orpBll21withPAPgenewasclonedintoAgrobacteriumstrainLBA4404byfreeze—thawmethod,andtheresuldngAgrobacteriumtransformantswereverifiedbyPCRamplificationThenthePAPgenewastransferredintoPetuniahybridabyleafdiscmethodmediatedby
6、theAgrobacteriamtransformantsTransgenieplantswereobminedthroughthescreeningwithkanamyeinPCRamplificationconfirmedtheresultsThispartofstudiesaccumulatedthefoundationfortheadvancesofplantgeneengineeringofPhybridaKeywords:P
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