亮葉楊桐的抗氧化活性研究.pdf

1、糖尿病是由于胰島功能障礙、胰島素抵抗等引起的機(jī)體內(nèi)碳水化合物代謝紊亂綜合征。糖尿病及其并發(fā)癥已經(jīng)成為繼心腦血管疾病、癌癥之后威脅人類(lèi)生命健康的第三大殺手。近年越來(lái)越多的研究顯示，糖尿病患者體內(nèi)過(guò)多的活性氧會(huì)加劇糖尿病及誘發(fā)糖尿病的慢性并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展。因此改善體內(nèi)氧化能力成為治療糖尿病及其并發(fā)癥的重要手段，而黃酮類(lèi)化合物有非常好的抗氧化活性，是目前尋求新的天然抗氧化劑、抗氧化應(yīng)激的研究熱點(diǎn)。
　　 亮葉楊桐系山茶科(Theac

2、eae)楊桐屬(Adinandra)植物，亮葉楊桐（AdinandranitidaMerr.exHL.Li)的干燥葉，富含黃酮、酚類(lèi)物質(zhì)，具有抗氧化、抗菌、抗腫瘤等多種生物活性。在我國(guó)南方廣西等地使用歷史悠久。然而學(xué)術(shù)界對(duì)亮葉楊桐的研究比較滯后，相關(guān)文獻(xiàn)資料報(bào)道較少，其對(duì)糖尿病及其并發(fā)癥的影響更是空白。為了豐富亮葉楊桐的藥理活性研究，尋找其主要的藥理活性組分，本論文將石芽茶的乙醇提取物分為極性不同的四個(gè)組分，通過(guò)體外抗氧化模型、細(xì)胞水平

3、抗氧化實(shí)驗(yàn)以及STZ糖尿病大鼠模型等系統(tǒng)研究不同組分的抗氧化活性及其降糖效果，旨在探討探討抗氧化活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，闡明其對(duì)糖尿病及其并發(fā)癥的影響機(jī)制。主要內(nèi)容有:
　　 (1)亮葉楊桐不同組分化學(xué)成分研究
　　 將亮葉楊桐乙醇提取物用不同溶劑劃分為四個(gè)極性不同的組分，測(cè)定各個(gè)組分的總黃酮和總酚含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn):黃酮在乙酸乙酯和正丁醇部位的含量最高，其中正丁醇部位的黃酮類(lèi)成分山茶苷A的含量為433.87mg/g。福林酚法測(cè)得的

4、總酚含量在乙酸乙酯最高，含量為367.9mg/g。對(duì)乙酸乙酯組分和正丁醇組分進(jìn)行進(jìn)一步分離中得到兩個(gè)化合物，經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定，為山茶苷A和芹菜素。
　　 (2)體外抗氧化活性研究
　　 將各個(gè)組分通過(guò)體外清除自由基、HepG2細(xì)胞模型抗氧化實(shí)驗(yàn)測(cè)定對(duì)體外各種自有基（如超氧陰離子、羥基自由基、DPPH、ABTS自由基等）的清除能力及總還原能力，并且測(cè)定各部位對(duì)HepG2細(xì)胞內(nèi)活性氧的清除能力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯和正丁醇兩個(gè)組分的抗

5、氧化能力較強(qiáng)。
　　 (3)以STZ糖尿病大鼠為模型的體內(nèi)抗氧化影響的研究
　　 對(duì)體外抗氧化實(shí)驗(yàn)篩選出來(lái)的兩個(gè)活性組分乙酸乙酯和正丁醇組分通過(guò)STZ誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型進(jìn)行長(zhǎng)期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，考察亮葉楊桐各活性組分體內(nèi)抗氧化的能力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大鼠血漿中的超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)活力顯著升高、脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量明顯下降。
　　 (4)降糖機(jī)制初步研究α-糖苷酶抑制和HepG2細(xì)胞葡萄

6、糖吸收的試驗(yàn)
　　 在長(zhǎng)期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)亮葉楊桐乙酸乙酯組分和正丁醇組分可以逐步降低STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠空腹血糖(FBG)，且乙酸乙酯組分使血糖的降幅更大，血漿胰島素含量也顯著增加。針對(duì)亮葉楊桐明顯降低STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠血糖的活性組分，探求其降糖機(jī)制。我們檢測(cè)亮葉楊桐活性組分對(duì)HepG2細(xì)胞葡萄糖攝取的影響以及對(duì)α-糖苷酶的抑制活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，亮葉楊桐活性組分對(duì)大鼠血糖的影響不是通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖降低血漿葡萄糖含量，也