紅花籽粕抗氧化肽的制備及抗氧化活性研究.pdf

1、隨著生活水平的提高,人們對(duì)食品和營(yíng)養(yǎng)的需求越來(lái)越多,天然的抗氧化肽在食品和醫(yī)藥領(lǐng)域中具有潛在的應(yīng)用前景,并且越來(lái)越受到人們的關(guān)注。紅花籽蛋白作為一種新型的蛋白資源,具有很高的開(kāi)發(fā)研究?jī)r(jià)值。本課題研究主要內(nèi)容是針對(duì)新疆紅花籽粕蛋白提取以及紅花籽蛋白抗氧化肽的制備工藝、肽的分離純化及其體外抗氧化活性的研究。
　　論文首先研究了紅花籽蛋白抗氧化肽的酶解工藝。通過(guò)單因素試驗(yàn),響應(yīng)面回歸分析得到酶解的最佳工藝為:采用Alcalase2.4L

2、堿性蛋白酶為酶源,水解時(shí)間2h,水解溫度49℃,pH值為8.6,酶添加量7700u/g,底物濃度5.0％。最優(yōu)酶解條件下,得到酶解液的還原能力為1.017,具有較好的抗氧化活性,此時(shí)紅花籽蛋白的水解度為6.389%。
　　采用膜過(guò)濾對(duì)制備的紅花籽抗氧化肽粗品進(jìn)行超濾分級(jí),將紅花籽抗氧化肽粗品按照分子量范圍分為<5KDa、10-5KDa及>10KDa三種紅花籽抗氧化肽,并對(duì)這三種肽進(jìn)行DPPH自由基清除能力測(cè)定。結(jié)果表明分子量在5K

3、Da以下的紅花籽抗氧化肽的抗氧化活性最高,所以,選取5KDa以下的紅花籽抗氧化肽進(jìn)行后續(xù)的凝膠層析純化。
　　分子量小于5KDa的紅花籽抗氧化肽經(jīng)SephadexG-25凝膠柱色譜進(jìn)一步分離純化后,得到了三個(gè)洗脫峰,根據(jù)SephadexG-25繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線可知:第三個(gè)洗脫峰有較強(qiáng)的抗氧化活性,分子量范圍在885Da左右。
　　通過(guò)對(duì)還原能力以及對(duì)超氧陰離子、羥自由基和DPPH自由基清除能力的測(cè)定,考察了紅花籽抗氧化活性肽的