利用淋巴細(xì)胞培養(yǎng)法評(píng)估人體維生素需求量的技術(shù)及其應(yīng)用.pdf

1、維生素是維持人體生長(zhǎng)發(fā)育和代謝不可缺少的物質(zhì)，缺乏時(shí)會(huì)影響正常生理機(jī)能，從而對(duì)人體健康造成影響。維生素需求評(píng)估是人體健康評(píng)估的一部分。由于人體對(duì)維生素的需求量受多種因素的影響，目前常用的評(píng)估方法在反映個(gè)性化需求方面存在不足。本論文利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，將被評(píng)估對(duì)象的淋巴細(xì)胞置于一系列培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，通過對(duì)比細(xì)胞在含不同維生素的培養(yǎng)基中增值能力的差異，來對(duì)個(gè)體的六種維生素需求進(jìn)行評(píng)估。
　　目的:建立利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)評(píng)估人體六種維生素

2、需求情況的方法，并對(duì)本方法的有效性進(jìn)行研究。
　　方法:配制一系列的培養(yǎng)基，其中包括完全培養(yǎng)基、六種缺失不同的維生素（維生素B1，B2，B12，葉酸，泛酸，生物素）缺失型培養(yǎng)基。將人的淋巴細(xì)胞自血液中分離后接種于以上培養(yǎng)基中進(jìn)行72h的培養(yǎng)，隨后利用氚標(biāo)記胸腺嘧啶核苷摻入法對(duì)細(xì)胞的增殖情況進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)對(duì)培養(yǎng)基中植物血凝素的濃度、細(xì)胞接種量、培養(yǎng)時(shí)間、同位素標(biāo)記時(shí)間、同位素標(biāo)記濃度等各實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了優(yōu)化。通過四例樣本的重復(fù)實(shí)驗(yàn)，對(duì)

3、本方法的可行性進(jìn)行了初步驗(yàn)證。隨后增加研究規(guī)模，對(duì)119例樣本進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算各樣本的R值(R值=細(xì)胞在缺失型培養(yǎng)基中的讀數(shù)平均值/細(xì)胞在完全培養(yǎng)基中的讀數(shù)平均值×100)。篩選出R值水平最低的樣本，進(jìn)行為期一個(gè)月的維生素補(bǔ)充后，對(duì)干預(yù)的效果及檢測(cè)方法的有效性進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　結(jié)果:利用完全培養(yǎng)基、六種維生素缺失型培養(yǎng)基對(duì)四例樣本進(jìn)行四次檢測(cè)，各維生素四次重復(fù)的CV不超過16％;同一種維生素的R值在志愿者間存在明顯的差異;對(duì)119人進(jìn)