擬南芥乙醇脫氫酶純化及酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩61頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、乙醇脫氫酶是許多有機體中主要短鏈醇代謝的關(guān)鍵酶。典型的乙醇脫氫酶是一個鋅結(jié)合酶，以二聚體形式作用且依賴NAD(P)+輔助因子互變乙醇和乙醛。植物ADH的3個保守功能域分別為鋅結(jié)合位點、Rossmann折疊NAD(P)+結(jié)合蛋白和具有GroES結(jié)構(gòu)的ADH_N結(jié)構(gòu)域。這3個保守結(jié)構(gòu)在物種中具有相當高的保守性。為了探究擬南芥乙醇脫氫酶的結(jié)構(gòu)與生化特性，本實驗構(gòu)建了擬南芥ADH蛋白的原核表達載體，純化可溶性ADH蛋白并進行體外功能結(jié)構(gòu)試驗。主

2、要結(jié)果如下：
　　1.成功構(gòu)建得到的原核表達擬南芥ADH蛋白載體，以pET-HTT為表達載體，Rosetta為宿主表達細菌，20℃條件下0.1％IPTG誘導(dǎo)15 h，純化得到了高純度的擬南芥ADH蛋白。
　　2.利用全波長酶標儀測量反應(yīng)產(chǎn)物NADH在340 nm的吸光度值的變化和生化反應(yīng)動力學(xué)理論，得到了擬南芥ADH酶學(xué)性質(zhì)，包括最適反應(yīng)PH為10.5，具有廣泛的底物選擇性，最適反應(yīng)底物為乙醇。最大反應(yīng)速率Vmax（NAD）

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論