萊菔素抗肝癌細胞蛋白質(zhì)組學研究.pdf

1、十字花科植物如萊菔子已在中藥史上有很長的用藥記載，它可以作為抗癌和抗炎功效的藥物。萊菔素是提取自萊菔子的天然異硫氰酸酯成分，萊菔素的存在與萊菔子具有抗癌活性密切相關。盡管如此，萊菔素能殺死癌細胞的機制尚未研究清楚。在本課題的研究中，萊菔素的一種抗肝癌機制被闡明。主要研究結論如下:
　　1、萊菔素對肝癌HepG2和SMMC7721細胞以濃度和時間依賴的方式產(chǎn)生一定的細胞毒性。為了驗證萊菔素抑制癌細胞生長是由于誘導細胞凋亡，采用流式細

2、胞儀測定萊菔素作用肝癌細胞誘導凋亡的情況?？隙巳R菔素對肝癌的作用效果。
　　2、建立了高質(zhì)量、穩(wěn)定且重復性高的肝癌HepG2細胞系總蛋白質(zhì)二維電泳分離技術實驗條件。結論為:HepG2細胞蛋白經(jīng)過水化液選擇含有7M尿素和2M硫脲的配方裂解，超濾離心方法除鹽，運用Bradford法進行蛋白質(zhì)定量，一向等點聚焦IPG膠條為17 cm、pH3-10非線性，聚焦90000伏小時，二向SDS-PAGE膠濃度選擇10％，染色方法為銀染。

3、>　　3、在蛋白質(zhì)組學的研究基礎下，我們首次發(fā)現(xiàn)KRT8是萊菔素抗肝癌的靶標。萊菔素抑制KRT8和KRT18的表達可以激活Fas死亡受體信號轉導通路并且使肝癌細胞發(fā)生失巢凋亡。
　　4、在數(shù)量繁多的中間絲狀蛋白家族中，KRT8和KRT18在上皮細胞中可以抵抗幾種造成細胞死亡的壓力，而且KRT8和KRT18的減少在Fas誘導的細胞凋亡過程中有很重要的作用。與此一致，我們發(fā)現(xiàn)萊菔素處理肝癌細胞或者RNA干擾都可以抑制KRT8和KRT1