轉基因煙草細胞外鈣調素檢測及G蛋白在其跨膜信號轉導中的作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、鈣調素(Calmodulin,CaM)傳統(tǒng)上被認為是一種重要的胞內Ca<'2+>受體,但近年來人們發(fā)現(xiàn)它不僅在胞外廣泛存在而且還具有多種生物學功能.例如:促進細胞增殖、花粉萌發(fā)和花粉管伸長、調控基因表達等.但有關其結構特性和信號轉導機制還不清楚.該文用Western-blot的方法,利用植物CaM單克隆體從轉基因煙草懸浮培養(yǎng)細胞胞外介質中檢測到CaM的存在,其分子量約為20.5kDa,與胞內CaM分子量17kDa存在差異.另外通過細菌毒

2、素實驗證明,G蛋白激活劑CTX可以促進轉基因煙草rbcS基因表達,而異三聚體G蛋白抑制劑PTX則抑制rbcS基因表達;同時證實PTX可以抑制外源CaM促進的rbcS基因表達,而CTX可以恢復被W<,7>-agarose抑制的rbcS基因表達.這表明在胞外CaM調控轉基因煙草rbcS基因表達過程中有異三聚體G蛋白的參與.通過提純包埋有GTPase活性測定熒光底物的質膜正向型囊泡,證明外源的CaM可以直接激活質膜正向型囊泡的異三聚體G蛋白G

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