2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究小鼠骨髓來源的Sca-1+/CD31+亞群與Sca-1+/CD31-亞群在向心肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的分化能力及其心梗修復(fù)能力的差異。
  方法:從小鼠骨髓中分離出具有多向分化潛能的骨髓單個核細(xì)胞(Bone Mononuclear Cells,BMNCs),進一步通過流式細(xì)胞術(shù)分選出 Sca-1+/CD31+亞群與Sca-1+/CD31-亞群。在添加血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF),成纖維細(xì)胞生長因子(hFGF-B),表皮

2、細(xì)胞生長因子(EGF),胰島素生長因子(R3-IGF-1)和抗壞血酸(Ascorbic acid)的5%FBS/EBM-2中培養(yǎng)14天,進而通過免疫熒光染色和RT-PCR檢測內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物vWF,VE-cadherin和CD31的表達。以此來比較骨髓來源的不同祖細(xì)胞亞群向血管內(nèi)皮細(xì)胞定向分化能力的差異。在添加Wnt通路拮抗劑DKK-1,二甲基亞砜(DMSO),骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP-2),成纖維細(xì)胞生長因子(FGF-4和FGF-8),以

3、及5-氮胞苷(第一至第三天)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中培養(yǎng)14天,進而通過免疫熒光染色和RT-PCR檢測心肌細(xì)胞標(biāo)志物Nkx2.5,cTnT和GATA-4等的表達。從而比較小鼠骨髓來源的不同祖細(xì)胞亞群向心肌定向分化能力的差異。氣管插管開胸行小鼠冠狀動脈前降支(LAD)結(jié)扎,建立小鼠心肌梗死的模型。將 Sca-1+/CD31+亞群、Sca-1+/CD31-亞群和單個核細(xì)胞(MNCs)注射入梗死心肌周圍,7天和28天后分別檢測心臟超聲并于28天取心臟組

4、織,檢測細(xì)胞存活、血管再生和心肌纖維化程度。
  結(jié)果:免疫熒光染色和 RT-PCR的結(jié)果表明,在血管內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,Sca-1+/CD31+亞群更易于分化成血管內(nèi)皮細(xì)胞,而 Sca-1+/CD31-亞群增殖緩慢,內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)志物表達很低;在心肌細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,Sca-1+/CD31-亞群更易于分化成心肌細(xì)胞,cTnT的陽性表達率高于 Sca-1+/CD31+亞群和 MNCs。體內(nèi)注射骨髓來源的祖細(xì)胞亞群,心臟彩超提示:7

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