ERK1-2信號(hào)通路調(diào)控PSD-95對(duì)OSAS大鼠認(rèn)知功能障礙的作用研究.pdf

1、目的：
　　觀察ERK1/2信號(hào)通路抑制劑SL327干預(yù)后OSAS模型大鼠認(rèn)知行為學(xué)改變及海馬區(qū)PSD-95、p-ERK1/2的表達(dá)變化情況，并探討其可能機(jī)制。
　　方法：
　　健康雄性SD大鼠50只隨機(jī)分為正常對(duì)照組，間歇性缺氧7d、14d、21d、28d組，SL327干預(yù)組（CIH28d），溶劑對(duì)照組（CIH28d）。采用慢性間歇性缺氧法建立OSAS大鼠模型，通過(guò)Western blotting檢測(cè)大鼠間歇性缺氧7

2、d、14d、21d、28d海馬區(qū)p-ERK1/2、PSD-95的表達(dá)變化規(guī)律，然后在p-ERK1/2表達(dá)達(dá)到高峰期期間使用SL327對(duì)模型組進(jìn)行干預(yù)，對(duì)比觀察SL327對(duì)OSAS模型大鼠海馬區(qū)p-ERK1/2、PSD-95表達(dá)變化的影響，并采用Morris水迷宮、HE染色及免疫組化對(duì)其行為學(xué)、組織病理學(xué)及目的蛋白的細(xì)胞定位進(jìn)行觀察和分析。
　　結(jié)果：
　　1.缺氧間期對(duì)大鼠進(jìn)行血氧飽和度監(jiān)測(cè)分析，其血氧飽和度平均值為（67.

3、49±3.69）％，相比復(fù)氧間期（96.15±1.81）%明顯降低（P<0.05），且出現(xiàn)抬頭呼吸、腹式呼吸加深等表現(xiàn)，符合OSAS模型判定標(biāo)準(zhǔn)。
　　2.Morris水迷宮結(jié)果顯示：與正常對(duì)照組相比，CIH7d組大鼠的逃避潛伏期及空間探索穿越平臺(tái)次數(shù)無(wú)明顯變化，而CIH14d、CIH21d、CIH28d三個(gè)時(shí)間點(diǎn)大鼠逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)（P<0.05），且與間歇性缺氧時(shí)間正相關(guān)（P<0.05），其空間探索穿越平臺(tái)次數(shù)明顯減少（P<

4、0.05），且與間歇性缺氧時(shí)間負(fù)相關(guān)（P<0.05）； SL327干預(yù)組（CIH28d）大鼠逃避潛伏期與同時(shí)期CIH組相比明顯縮短（P<0.05），空間探索穿越平臺(tái)次數(shù)與同時(shí)期CIH組相比明顯增加（P<0.05）。
　　3.HE染色結(jié)果顯示：正常對(duì)照組大鼠海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞密集，排列規(guī)則；CIH28d組大鼠海馬區(qū)可見(jiàn)神經(jīng)細(xì)胞胞體縮小，結(jié)構(gòu)不規(guī)則，胞漿嗜伊紅濃染，細(xì)胞核固縮明顯，細(xì)胞間隙擴(kuò)大；SL327組大鼠海馬區(qū)可見(jiàn)部分神經(jīng)細(xì)胞變性壞

5、死，胞漿輕度嗜伊紅染色，但程度均比CIH28d組輕。
　　4.Western blotting結(jié)果顯示：各組大鼠海馬組織中均檢測(cè)到p-ERK1/2的表達(dá)，與正常對(duì)照組相比，CIH7d、CIH14d、CIH21d、CIH28d四個(gè)時(shí)間點(diǎn)的蛋白表達(dá)均上調(diào)（P＜0.05），且從CIH14d起隨間歇性缺氧時(shí)間的增加逐漸升高（P＜0.05）；SL327干預(yù)組（CIH28d）與CIH28d相比明顯降低（P<0.05）。各組大鼠海馬組織中均檢測(cè)

6、到PSD-95的表達(dá)，與正常對(duì)照組相比，CIH14d、CIH21d、CIH28d三個(gè)時(shí)間點(diǎn)蛋白表達(dá)均下降（P＜0.05），且從CIH14d起隨間歇性缺氧時(shí)間的增加逐漸降低（P＜0.05），但CIH7d組無(wú)明顯變化；SL327（CIH28d）組與同時(shí)期CIH組相比明顯升高（P<0.05）。
　　5.免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示：大鼠海馬區(qū)p-ERK1/2陽(yáng)性染色細(xì)胞呈棕黃色或黃色，主要在神經(jīng)細(xì)胞胞核和胞漿中表達(dá)；PSD-95陽(yáng)性染色細(xì)胞呈棕