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文檔簡介
1、目的:檢測Slit2/Robo信號通路在大鼠血管平滑肌(VSMC)的表達(dá)情況,并觀察外源性Slit2蛋白對VSMC遷移能力及對其受體Robo表達(dá)的影響。
方法:培養(yǎng)原代血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)并鑒定。細(xì)胞遷移實驗采用改良Boyden小室法,下室加入不同濃度的Slit2及PDGF-BB;細(xì)胞增殖實驗采用CCK-8法。RT-PCR檢測血管平滑肌細(xì)胞中Slit2、Robo基因的表達(dá)情況及Slit2刺激后Robo表達(dá)的變化。細(xì)胞免疫熒光檢測
2、血管平滑肌細(xì)胞中Slit2、Robo蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:Slit2、Robo1、Robo2和Robo4的基因及蛋白在大鼠的血管平滑肌細(xì)胞中均有表達(dá),其中Robo4的基因為弱表達(dá)。外源性Slit2對VSMC的增殖沒有影響,而對血管平滑肌(VSMC)的遷移能力表現(xiàn)為抑制作用,對PDGF所誘導(dǎo)的VSMC遷移也表現(xiàn)為抑制作用。在外源性Slit2作用下,Robo1基因表達(dá)增加,Robo2基因表達(dá)減少,Robo4基因表達(dá)增加。
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