Tenascin-C在小鼠動脈粥樣硬化斑塊中的表達(dá)及靶向MR體內(nèi)成像的實(shí)驗研究.pdf

1、目的
　　1.檢測Tenascin-C在ApoE-/-小鼠動脈粥樣硬化斑塊形成過程中，不同時期(4、8、16、24、32w)表達(dá)的動態(tài)變化，探討其表達(dá)特性。
　　2.探討MR靶向探針anti-Tenascin-C-USPIO在動脈粥樣硬化斑塊中的特異性成像，為臨床動脈粥樣硬化分子成像的應(yīng)用提供實(shí)驗依據(jù)。
　　材料和方法
　　1.取ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠50只，高脂飼料喂養(yǎng)，建立小鼠動脈粥樣硬化(A

2、S)模型，C57BL/6小鼠50只為同源對照組，普通飲食喂養(yǎng)。分別于喂養(yǎng)第4、8、16、24、32周(w)時處死小鼠，檢測血脂，顯微鏡觀察斑塊病理改變并進(jìn)行定量分析，免疫組織化學(xué)方法檢測動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)Tenascin-C的表達(dá)。
　　2.20只ApoE-/-小鼠予高脂飲食喂養(yǎng)建立動脈粥樣硬化模型，將其分為靶向探針組10只，對照組10只，分別喂養(yǎng)至16、24w，探針組注射anti-Tenascin-C-USPIO，對照組注射單純

3、USPIO(n=5/組/周)，于注射24h后進(jìn)行7.0T MR成像，檢測斑塊信號改變。成像后立刻取主動脈標(biāo)本進(jìn)行Tenascin-C免疫組化染色，并行普魯士藍(lán)染色，觀察斑塊內(nèi)鐵沉積。
　　結(jié)果
　　1.模型組總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)水平均高于對照組(P均＜0.05)。隨著造模時間的進(jìn)展，模型組斑塊面積及斑塊面積/管腔面積比值不斷增加，各時期比較均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。模型組斑塊內(nèi)Tenascin-C表

4、達(dá)量隨著AS進(jìn)展而升高，AS32w小鼠斑塊內(nèi)部Tenascin-C表達(dá)升高最顯著，高于8、16、24w小鼠(0.49±0.07 vs0.04±0.02，0.12±0.03，0.21±0.04，P＜0.05)。
　　2.靶向探針組的斑塊信號改變率較對照組明顯降低(16w:-15.65±0.78％ vs.-3.43±2.57％;24w:-26.38±1.54％ vs.-11.12±1.60％，P＜0.05)。并且在靶向探針組中，24w

5、時斑塊的信號改變率較16w亦明顯降低(P＜0.05)。免疫組化染色顯示探針組Tenascin-C隨著斑塊進(jìn)展表達(dá)升高，與MR圖像斑塊信號改變程度相一致。普魯士藍(lán)染色顯示探針組斑塊內(nèi)較多藍(lán)染顆粒，而對照組則極少。
　　結(jié)論
　　1.Tenascin-C的表達(dá)量隨著斑塊進(jìn)展不斷增加，主要表達(dá)于脂核周圍及破裂的纖維帽中，Tenascin-C的表達(dá)水平變化可能與動脈粥樣硬化進(jìn)展及斑塊不穩(wěn)定性有關(guān)。
　　2.7.0T MR可以對