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文檔簡介
1、目的:
通過觀察動脈粥樣硬化大鼠模型的胸主動脈組織中Legumain的表達及蛋白水平的改變,探討Legumain與主動脈粥樣硬化斑塊可能的關(guān)系。
方法:
30只8~10周齡健康雄性Wistar大鼠,隨機數(shù)字法分為2組。模型組(18只)及正常對照組(12只)。模型組:飼喂高脂飼料(添加丙基硫氧嘧啶),在飼養(yǎng)開始時,連續(xù)3天腹腔注射維生素D32 mL/kg;正常對照組:飼喂基礎(chǔ)飼料,腹腔注射生理鹽水2 mL/k
2、g。每4周記錄一次體重。造模12周后,取血清測定TC、TG、HDL、LDL,計算動脈粥樣硬化指數(shù)(atherosclerotis index,AI);處死,取胸主動脈留存。HE染色觀察胸主動脈粥樣硬化斑塊結(jié)構(gòu)以確認造模成功。應(yīng)用免疫組化檢測胸主動脈中Legumain蛋白的分布和表達,Westem Blot法測定胸主動脈中Legumain蛋白水平和RT-PCR法測定胸主動脈中Legumain的mRNA水平。
結(jié)果:
H
3、E染色:模型組與對照組比較可見動脈粥樣硬化斑塊;模型組與對照組的TC、LDL濃度及AI的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。免疫組化結(jié)果:對照組胸主動脈壁內(nèi)存在少量Legumain表達,主要分布于成纖維細胞和血管內(nèi)皮細胞胞核內(nèi),少數(shù)胞漿也有少量表達,模型組胸主動脈壁內(nèi)Legumain表達明顯增強,以單核-巨噬細胞胞核、胞漿和間質(zhì)內(nèi)表達為主。RT-PCR和Western Blot結(jié)果顯示mRNA水平和Legumain蛋白在主動脈粥樣硬化(
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