蜜源花粉中多不飽和脂肪酸(PUFAs)的研究.pdf

1、本論文以我國(guó)有代表性的蜜源花粉為原料，使用氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)、超臨界CO2萃取技術(shù)等現(xiàn)代科技手段，以油脂領(lǐng)域通常采用的從脂質(zhì)到脂肪酸再到多不飽和脂肪酸的學(xué)術(shù)思路，對(duì)花粉中多不飽和脂肪酸(PUFAs)的相關(guān)內(nèi)容進(jìn)行了較為全面的研究。采用索氏提取法首次測(cè)定了哈蜜瓜花粉、五倍子花粉、茵陳花粉、獼猴桃花粉、黃柏花粉、益母草花粉六種花粉的脂質(zhì)含量。虞美人花粉的脂質(zhì)測(cè)定在國(guó)內(nèi)也是第一次。 用氣相-質(zhì)譜技術(shù)測(cè)定了前人沒(méi)有測(cè)定的哈蜜

2、瓜花粉、五倍子花粉、茵陳花粉、獼猴桃花粉、黃柏花粉、益母草花粉、山楂花粉七種花粉的脂肪酸。虞美人花粉脂肪酸在國(guó)內(nèi)亦屬首次測(cè)定。第一次在玉米花粉中檢出α-亞麻酸、在油菜花粉和向日葵花粉中分別檢出十六碳三烯酸。對(duì)16種不同花粉PUFAs等指標(biāo)分析表明，花粉的PUFAs含量居總脂肪酸(TFAs)首位，飽和脂肪酸(SFAs)居次位，單不飽和脂肪酸(SUFAs)最少。PUFAs的平均含量是45.74％。SFAs的平均含量是42.35％

3、。SUFAs的平均含量是10.62％。在PUFAs中，α-亞麻酸(ALA)和亞油酸(LA)最豐富，平均含量分別為28.00％和17.37％。而在SFAs中，十六烷酸的含量最高，平均含量為32.60％。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)花粉含有大量的ALA而未檢測(cè)到γ-亞麻酸(GLA)，而ALA是人體必需脂肪酸。在過(guò)去文獻(xiàn)中，均沒(méi)有區(qū)別檢測(cè)ALA和GLA兩種同分異構(gòu)體。因此本研究比前人提升了一步。 深入研究了不同破壁方法對(duì)花粉PUFAs等相關(guān)指標(biāo)的

4、影響。就脂質(zhì)得率來(lái)說(shuō)，以纖維素酶水解破壁法的效果最好，冷凍破壁法和超聲波破壁法相對(duì)較差。通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)得出酶解破壁法的最佳實(shí)驗(yàn)條件：加酶量為0.75％(酶/花粉)、pH4.5、反應(yīng)溫度50℃、時(shí)間5h。在此條件下的酶解破壁法與索氏提取法比較，前者大幅度增加PUFAs含量，由39.41％上升到78.48％。明顯減少SFAs含量。稍微減少SUFAs含量。到目前為止，尚未見(jiàn)有運(yùn)用酶解破壁法研究花粉PUFAs的報(bào)道。首次探討了超臨界

5、CO2萃取法(SFE-CO2)對(duì)提取花粉PUFAs等指標(biāo)的影響。就脂質(zhì)得率來(lái)說(shuō)，通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)獲得最佳實(shí)驗(yàn)條件為：萃取壓力35 MPa、萃取溫度45℃、萃取時(shí)間1.5h、原料粒度20目～40目。在此SFE-CO2萃取條件下，與索氏提取法相比較，PUFAs增幅不大；SUFAs增加較多；SFAs則減幅較大。通過(guò)SFE-CO2，首次在花粉中測(cè)出二十四碳烯酸(C24：1，又叫神經(jīng)酸)，神經(jīng)酸在大腦發(fā)育和智力提高方面有重要意義。與索氏提

6、取法比，SFE-CO2還新增加了十六碳烯酸(C16：1，又叫棕櫚油酸)和十六碳二烯酸(C16：2)。采用尿素包合法對(duì)花粉PUFAs富集的最佳條件為：脲酯比3.0：1(質(zhì)量比)、溫度20℃、溶劑為甲醇。在此條件下，一次脲包后，PUFAs含量由39.41％上升為70.88％，SFAs和SUFAs的含量顯著下降。二次脲包后，PUFAs含量再次上升到84.61％，SFAs和SUFAs含量則繼續(xù)下降。達(dá)到了富集濃縮PUFAs的目的。尿

7、素包合法對(duì)花粉PUFAs富集研究尚未見(jiàn)報(bào)道。對(duì)同～油菜花粉品種中PUFAs等指標(biāo)與不同氣候條件之間關(guān)系的研究發(fā)現(xiàn)，隨著氣溫由高到低，油菜花粉的PUFAs、TUFAs(總不飽和脂肪酸)和IUFA(不飽和指數(shù))則由低到高?；ǚ壑械倪@一現(xiàn)象是首次發(fā)現(xiàn)。此實(shí)驗(yàn)還在油菜花粉中第一次檢測(cè)到十六碳烯酸和十六碳二烯酸。油菜花粉PUFAs調(diào)節(jié)血脂的功能實(shí)驗(yàn)表明，在中劑量組(4 ml/kg)作用下，與對(duì)照比較，TC、TG和LDL-C降幅分別為4

8、0.81％、31.21％和34.38％，HDL-C增幅為13.51％。這說(shuō)明油菜花粉PUFAs有確切的調(diào)節(jié)血脂功能?；ǚ跴UFAs對(duì)高血脂癥大鼠的調(diào)節(jié)血脂研究以前未見(jiàn)文獻(xiàn)記載。鑒于重要的PUFAs有多方面功效，而花粉富含LA和ALA，且AA(花生四烯酸)、EPA(二十碳五烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸)可由LA或ALA代謝形成。因此全面深入研究花粉PUFAs具有重要意義。關(guān)鍵詞：花粉；多不飽和脂肪酸；纖維素酶；尿素包合法；超