硅藻中多不飽和脂肪酸的抗腫瘤作用研究.pdf

1、本論文是在硅藻（Nitzschia.laevis）中提取并分離主要生物活性物質(zhì)多不飽和脂肪酸(PUFAs)的基礎(chǔ)上，考察其對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖抑制的作用，并對(duì)其抗腫瘤作用及其機(jī)理進(jìn)行了初步研究，從而為研究硅藻中PUFAs的抗腫瘤活性提供理論依據(jù)。
　　 花生四烯酸(AA)是ω-6 PUFAs，二十碳五烯酸(EPA)是ω-3 PUFAs，以不同比例的AA和EPA檢測(cè)對(duì)不同癌細(xì)胞株生長(zhǎng)增殖的影響。發(fā)現(xiàn)單獨(dú)使用EPA能夠抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，

2、隨著AA的加入，減弱了這種腫瘤增殖抑制作用，EPA最佳作用劑量為75μg/mL，且對(duì)人正常肝L-02細(xì)胞沒有明顯的抑制效果。EPA作用HepG-2細(xì)胞后經(jīng)HE、AO/EB染色可見細(xì)胞典型凋亡現(xiàn)象。
　　 EPA通過提高腫瘤細(xì)胞內(nèi)活性氧的表達(dá)水平，從而上調(diào)JNK、ERK的磷酸化水平，且這種表達(dá)的上調(diào)能夠被抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸(NAC)抑制。經(jīng)過Westernblotting法測(cè)定凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)，發(fā)現(xiàn)EPA誘導(dǎo)HepG-2細(xì)胞

3、中Bcl-2蛋白表達(dá)的降低，并且還誘導(dǎo)了細(xì)胞色素C從線粒體中釋放到胞漿中，激活了細(xì)胞凋亡的線粒體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。且這些變化都受到抗氧化劑NAC、ERK抑制劑PD98059、JNK抑制劑SP600125的抑制。EPA還引起了細(xì)胞線粒體膜電位的降低，細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的升高以及cleaved-caspase-3和cleaved-caspase-9表達(dá)量的升高，使細(xì)胞最終走向凋亡?？傊?，硅藻中提取的EPA能夠抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖，是通過受活性氧