艾滋病熱毒蘊結證蛋白組學標志物驗證研究.pdf

1、目的：基于iTRAQ技術的艾滋病熱毒蘊結證患者與健康人之間蛋白質差異表達的蛋白組學研究基礎上，通過Western Blot技術對顯著性差異蛋白進一步臨床驗證及中藥干預研究，觀察特征性蛋白在表達變化情況，探索藥物療效與證候特征性蛋白表達變化之間規(guī)律，為艾滋病熱毒蘊結證具有診斷及療效評價意義的蛋白分子標志物研究提供實驗依據，指導臨床中醫(yī)艾滋病證候診斷和療效評價。
　　方法：本研究應用艾復康膠囊聯(lián)合高效抗逆轉錄病毒治療（HAART）干預

2、艾滋病期熱毒蘊結證患者，療程為48周。分別于0周、48周采集全血及提取后血清樣本，檢測血細胞、病載、CD4+T、肝腎功等臨床基線指標?；谇捌趇TRAQ技術研究基礎上，采用蛋白質印跡法（Western Blot）技術分別對采集的AIDS熱毒蘊結證患者和健康對照組、熱毒蘊結證患者用藥前后血清標本進行差異蛋白檢測，運用image J軟件分析灰度值，將每泳道所得出目的蛋白的灰度值與相應的白蛋白灰度值做比較，得出相對灰度值，然后將每種抗體中的正

3、常組的相對灰度值和病人組的相對灰度值導入到GraphPad Prism5軟件，得出mean+/-SD的圖表。采用SPSS20．0統(tǒng)計軟件統(tǒng)計相關臨床資料。
　　結果：1、艾滋病期熱毒蘊結證組與正常對照組比較，C5在艾滋病期熱毒蘊結證表達下調，差異有統(tǒng)計學意義(P<0．05)，與iTRAQ篩選結果一致；keratin10在艾滋病期熱毒蘊結證表達下調，差異有統(tǒng)計學意義(P<0．05)，與iTRAQ篩選結果一致。
　　2、艾滋病期

4、熱毒蘊結證患者藥物干預后48周后與治療前比較，CD4+T、CD8+T趨于穩(wěn)定升高，CD4+T具有統(tǒng)計學意義(P＜0．05)，CD8+T無統(tǒng)計學意義。
　　3、艾滋病期熱毒蘊結證用藥前后比較，C5在艾滋病期熱毒蘊結證用藥后表達上調，差異有統(tǒng)計學意義(P<0．05)。
　　結論：1、本研究得出艾滋病艾滋病期熱毒蘊結證特征性蛋白質分別為C5、keratin10，這兩者有助于為艾滋病期熱毒蘊結證中醫(yī)候診斷提供客觀化依據。上述蛋白功能