兩個(gè)甘藍(lán)型油菜基因BnbZIP和BnHSP的克隆和表達(dá)分析.pdf

1、逆境相關(guān)基因在植物的抗逆境過程中發(fā)揮著重要作用，本研究克隆了兩個(gè)油菜逆境相關(guān)基因，分別是亮氨酸拉鏈蛋白(Leucinezipper protein gene，BnbZIP)，熱激蛋白基因(Heat shock protein gene，BnHSP)，分析了它們的序列特征和表達(dá)模式，構(gòu)建了油菜的過表達(dá)載體，并獲得了油菜轉(zhuǎn)化體，為進(jìn)一步研究BnbZIP和BnHSP在植物中的功能奠定了基礎(chǔ)。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1.油菜亮

2、氨酸拉鏈蛋白基因(BnbZIP)
　　①在甘藍(lán)型油菜中克隆了一個(gè)bZIP基因，命名為BnbZIP，其開放閱讀框(ORF)長(zhǎng)為534 bp，編碼177個(gè)氨基酸，氨基酸分子質(zhì)量為19875.1，等電點(diǎn)為6.91，半衰期為30小時(shí)，親水性為-0.934。②在油菜基因組中共搜索到192個(gè)油菜bZIP基因，基因CDS長(zhǎng)度由153個(gè)核苷酸到1908個(gè)核苷酸不等，平均長(zhǎng)度為816個(gè)核苷酸，基因的編碼長(zhǎng)度從43個(gè)氨基酸到601個(gè)氨基酸不等。③通過

3、對(duì)油菜、白菜、甘藍(lán)、擬南芥等多個(gè)物種的bZIP基因構(gòu)建進(jìn)化樹分析表明，bZIP基因家族在進(jìn)化中比較保守，油菜bZIP與擬南芥bZIP的親緣關(guān)系最近。④BnbZIP基因在油菜各組織均有表達(dá)，7天下胚軸中表達(dá)量最高，其次為7天子葉，開花期莖稈中表達(dá)最少。⑤構(gòu)建了BnbZIP的過表達(dá)載體，利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的花序侵染法轉(zhuǎn)入“中雙11號(hào)”油菜，獲得8株過表達(dá)BnbZIP基因的T0代單株。
　　2.油菜熱激蛋白基因（BnHSP）
　?、僭?/p>

4、甘藍(lán)型油菜中克隆了一個(gè)HSP基因，命名為BnHSP，其開放閱讀框(ORF)長(zhǎng)為2364bp，編碼787個(gè)氨基酸，氨基酸分子質(zhì)量為89563.9，等電點(diǎn)為4.97，半衰期為30 h，親水性為-0.593。②在油菜基因組中搜索到87個(gè)油菜HSP基因，基因CDS長(zhǎng)度由96個(gè)核苷酸到2925個(gè)核苷酸不等，平均長(zhǎng)度為1122個(gè)核苷酸，基因的編碼長(zhǎng)度從31個(gè)氨基酸到973個(gè)氨基酸不等。③通過對(duì)白菜、甘藍(lán)、擬南芥等多個(gè)物種的HSP基因構(gòu)建進(jìn)化樹分析表