兩個甘藍型油菜基因BnbZIP和BnHSP的克隆和表達分析.pdf

1、逆境相關(guān)基因在植物的抗逆境過程中發(fā)揮著重要作用，本研究克隆了兩個油菜逆境相關(guān)基因，分別是亮氨酸拉鏈蛋白(Leucinezipper protein gene，BnbZIP)，熱激蛋白基因(Heat shock protein gene，BnHSP)，分析了它們的序列特征和表達模式，構(gòu)建了油菜的過表達載體，并獲得了油菜轉(zhuǎn)化體，為進一步研究BnbZIP和BnHSP在植物中的功能奠定了基礎(chǔ)。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1.油菜亮

2、氨酸拉鏈蛋白基因(BnbZIP)
　　①在甘藍型油菜中克隆了一個bZIP基因，命名為BnbZIP，其開放閱讀框(ORF)長為534 bp，編碼177個氨基酸，氨基酸分子質(zhì)量為19875.1，等電點為6.91，半衰期為30小時，親水性為-0.934。②在油菜基因組中共搜索到192個油菜bZIP基因，基因CDS長度由153個核苷酸到1908個核苷酸不等，平均長度為816個核苷酸，基因的編碼長度從43個氨基酸到601個氨基酸不等。③通過

3、對油菜、白菜、甘藍、擬南芥等多個物種的bZIP基因構(gòu)建進化樹分析表明，bZIP基因家族在進化中比較保守，油菜bZIP與擬南芥bZIP的親緣關(guān)系最近。④BnbZIP基因在油菜各組織均有表達，7天下胚軸中表達量最高，其次為7天子葉，開花期莖稈中表達最少。⑤構(gòu)建了BnbZIP的過表達載體，利用農(nóng)桿菌介導的花序侵染法轉(zhuǎn)入“中雙11號”油菜，獲得8株過表達BnbZIP基因的T0代單株。
　　2.油菜熱激蛋白基因（BnHSP）
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4、甘藍型油菜中克隆了一個HSP基因，命名為BnHSP，其開放閱讀框(ORF)長為2364bp，編碼787個氨基酸，氨基酸分子質(zhì)量為89563.9，等電點為4.97，半衰期為30 h，親水性為-0.593。②在油菜基因組中搜索到87個油菜HSP基因，基因CDS長度由96個核苷酸到2925個核苷酸不等，平均長度為1122個核苷酸，基因的編碼長度從31個氨基酸到973個氨基酸不等。③通過對白菜、甘藍、擬南芥等多個物種的HSP基因構(gòu)建進化樹分析表