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1、四川農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文甘藍型油菜PEPC基因保守序列的克隆和種子特異性ihpRNA表達載體的構建姓名:張勇申請學位級別:碩士專業(yè):生物化學與分子生物學指導教師:牛應澤20080501利用質粒載體pBSNEI(此載體有兩個特點:1、內含子片段NEI(130bp)來自甘藍型油菜PEPC基因,由上海鼎安科技有限公司人工合成,2、內含子5’端反向插入載體pBS—NEI中),在內含子片段NEI兩端選擇合適的酶位點,把PEPC基因片段一個正向插入
2、,一個反向插入,建成具有反向重復框的載體pBS—B2一NEI—B1。4種子特異表達載體pCAMNapin的構建從pMDNapin載體上,經(jīng)BamHI和HindlII雙酶切切下來的Napin基因片段與經(jīng)同樣雙酶切的植物表達載體pCAMBIAl391連接,得到載體pCAMNapin5PEPC基因ihpRNA植物表達載體的構建把從pBSB2NEI—B1載體上,用酶切下的反向重復框連接到經(jīng)同種酶切且去磷酸化的表達載體pCAMNapin上,再克隆
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