超順磁性異煙肼PELA微球體內(nèi)外釋放及其安全性評價的初步研究.pdf

1、研究目的：
　　 1.制備超順磁性異煙肼聚乳酸-聚乙二醇共聚物(PELA)微球(superparamagnetic isoniazide Polylactide-polyethylene glycolcopolymers microspheres,spIPM)及研究其在振蕩磁場作用下體外釋放情況。
　　 2.研究超順磁性異煙肼PELA微球在振蕩磁場作用下動物體內(nèi)異煙肼的釋放規(guī)律。
　　 3.初步研究超順磁性異煙肼

2、PELA微球的安全性:超順磁性Fe3O4納米粒(superparamagnetic Fe3O4 nanoparticle,SPFN)對小鼠的急性毒性作用。
　　 研究方法：
　　 1.采用正交實驗優(yōu)化的復乳化(W/O/W)溶劑揮發(fā)法制備超順磁性異煙肼PELA微球。采用了紫外分光光度法測定spIPM的包封率和載藥量。采用小杯法測定體外微球中異煙肼釋放情況,分組方法如下,A組:超順磁性異煙肼PELA微球;B組:超順磁性異煙肼

3、PELA微球;C組:異煙肼PELA微球。A、C兩組在每次取樣前30min用振蕩磁場干擾15min,B組始終不用振蕩磁場干擾。
　　 2.采用復乳化(W/O/W)溶劑揮發(fā)法制備spIPM,選取18只新西蘭大白兔,隨機分為spIPM外加振蕩磁場干預組,spIPM組和異煙肼溶液組,對這3組分別進行肌肉注射。每隔15分鐘取靜脈血,用高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)測

4、定異煙肼的血藥濃度,比較這3組兔血中異煙肼的釋放情況。
　　 3.采用化學共沉淀法制備SPFN,應用透射電鏡和振動樣品磁場計等對SPFN進行形態(tài)觀察和結構表征測定。取60只小鼠按不同的給藥方式和劑量,隨機數(shù)字表法分為3組(n=20):口服灌胃組(總劑量:2104.8 mg/kg、容積:25 ml/kg),腹腔注射組(總劑量:1578.6mg/kg、容積:20ml/kg),尾靜脈注射組(總劑量:438.5 mg/kg、容積:10

5、ml/kg);每組另取10只小鼠予生理鹽水作為對照(n=10)。觀察小鼠的一般情況;全自動生化分析儀檢測小鼠主要血生化指標;HE染色觀察主要臟器的病理改變;瑞氏染色觀察骨髓組織。
　　 結果:
　　 1.超順磁性的A組微球在振蕩磁場的干擾下異煙肼的釋放明顯高于無振蕩磁場干預的超順磁性的B組微球中異煙肼的釋放。在相同振蕩磁場的干擾下,超順磁性的A組微球中異煙肼釋放明顯高于C組非磁性微球中異煙肼的釋放。
　　 2.與

6、單純注射異煙肼相比,spIPM能延緩異煙肼釋放,外加振蕩磁場時,可重復提高動物體內(nèi)spIPM中異煙肼的釋放量。
　　 3.制成的粒徑大小為15～20 nm,飽和磁化強度為21.431 emu/g,剩余磁化強度為0.1016 emu/g的SPFN,予SPFN2周后,各組小鼠均未死亡,血生化指標均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05),主要臟器和骨髓均未見炎癥、水腫、變性、壞死等改變。
　　 結論:
　　 1.體外釋放中,異煙