胍丁胺對酵母多糖誘導的小鼠膿毒癥的保護作用.pdf

1、目的：
　　探討胍丁胺(一種生物活性胺)對酵母多糖誘導的小鼠膿毒癥急性期的影響。
　　方法：
　　1.將32只成年雄性C57BL/6小鼠按隨機數字表法分為正常對照組[SHAM+PBS組，磷酸鹽緩沖液(PBS)0.5ml]、AGM對照組(SHAM+AGM組，AGM200mg/kg)、模型組(ZYM+PBS組，ZYM500mg/kg+PBS0.5ml)、AGM治療組(ZYM+AGM組，ZYM500 mg/kg+AGM200

2、mg/kg)4組，每組8只。AGM、ZYM、PBS為腹腔注射。給藥12h后觀察小鼠精神狀態(tài)；ELISA方法檢測血清及腹腔滲出液中TNF-α、IL-6，總一氧化氮檢測試劑盒檢測NO水平。
　　2.同時檢測肺和小腸組織中TNF-α、IL-6、髓過氧化物酶(MPO)活性及凋亡情況，并觀察組織病理學改變。ELISA方法檢測肺和小腸組織中核轉錄因子-κB p65(NF-κB p65)的DNA結合活性。
　　3.使用臨床實驗室標準實驗儀

3、器檢測肝、腎、胰腺血清酶標記物。
　　4.巨噬細胞加入不同濃度胍丁胺2h后使用80ug/ml酵母多糖刺激。12h后，ELISA方法檢測細胞培養(yǎng)上清中促炎及抗炎介質的分泌水平。
　　結果：
　　1.ZYM注射后12h小鼠精神萎靡、活動減少、飲水減少；而AGM治療組小鼠精神狀況、活動、飲水均好轉。AGM治療能夠降低ZYM誘導的血清及腹腔滲出液的TNF-α(ng/L：252.6±32.1比421.7±76.7，295.7±7

4、8.6比592.0±84.3，均P<0.05)、IL-6(ng/L：2198.8±281.8比4725.3±615.4，19829.3±3647.0比47751.3±5264.8，均P<0.05)和NO(μmol/L：33.2±4.3比50.2±5.2，14.0±3.6比45.4±5.2，均P<0.05)水平升高。
　　2.AGM治療也能夠抑制ZYM引起的肺和小腸組織TNF-α(ng/L：245.7±39.1比378.3±67.6

5、，P<0.05)、IL-6(ng/L：810.3±175.6比1172.4±203.3，P<0.05)、MPO活性(ng/mg：24.9±4.4比37.3±5.8，P<0.05]。熒光顯微鏡觀察表明AGM減少酵母多糖誘導的肺和小腸組織凋亡的發(fā)生。酵母多糖注射導致肺和小腸組織嚴重的炎癥反應，包括血管擴張、水腫及中性粒細胞浸潤等，AGM治療后以上損傷均有明顯緩解。此外，與酵母多糖組相比，AGM治療組直接抑制肺組織NF-κB p65DNA結合

6、活性(吸光度值：0.272±0.029比0.347±0.037，P<0.05)。小腸組織中ZYM+PBS組和ZYM+AGM組之間無明顯差異。
　　3.與酵母多糖組相比，AGM治療后可降低酵母多糖引起的肺、肝及胰腺酶標記物的升高。
　　4.體外實驗，AGM可抑制IL-6、TNF-α的產生，輕微增加IL-10的產生。
　　結論：
　　1.AGM能夠拮抗ZYM誘導的小鼠局部和全身炎癥因子IL-6、TNF-α、NO的產生