胍丁胺對(duì)酵母多糖誘導(dǎo)的小鼠膿毒癥的保護(hù)作用.pdf

1、目的：
　　探討胍丁胺(一種生物活性胺)對(duì)酵母多糖誘導(dǎo)的小鼠膿毒癥急性期的影響。
　　方法：
　　1.將32只成年雄性C57BL/6小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為正常對(duì)照組[SHAM+PBS組，磷酸鹽緩沖液(PBS)0.5ml]、AGM對(duì)照組(SHAM+AGM組，AGM200mg/kg)、模型組(ZYM+PBS組，ZYM500mg/kg+PBS0.5ml)、AGM治療組(ZYM+AGM組，ZYM500 mg/kg+AGM200

2、mg/kg)4組，每組8只。AGM、ZYM、PBS為腹腔注射。給藥12h后觀察小鼠精神狀態(tài)；ELISA方法檢測(cè)血清及腹腔滲出液中TNF-α、IL-6，總一氧化氮檢測(cè)試劑盒檢測(cè)NO水平。
　　2.同時(shí)檢測(cè)肺和小腸組織中TNF-α、IL-6、髓過(guò)氧化物酶(MPO)活性及凋亡情況，并觀察組織病理學(xué)改變。ELISA方法檢測(cè)肺和小腸組織中核轉(zhuǎn)錄因子-κB p65(NF-κB p65)的DNA結(jié)合活性。
　　3.使用臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)儀

3、器檢測(cè)肝、腎、胰腺血清酶標(biāo)記物。
　　4.巨噬細(xì)胞加入不同濃度胍丁胺2h后使用80ug/ml酵母多糖刺激。12h后，ELISA方法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中促炎及抗炎介質(zhì)的分泌水平。
　　結(jié)果：
　　1.ZYM注射后12h小鼠精神萎靡、活動(dòng)減少、飲水減少；而AGM治療組小鼠精神狀況、活動(dòng)、飲水均好轉(zhuǎn)。AGM治療能夠降低ZYM誘導(dǎo)的血清及腹腔滲出液的TNF-α(ng/L：252.6±32.1比421.7±76.7，295.7±7

4、8.6比592.0±84.3，均P<0.05)、IL-6(ng/L：2198.8±281.8比4725.3±615.4，19829.3±3647.0比47751.3±5264.8，均P<0.05)和NO(μmol/L：33.2±4.3比50.2±5.2，14.0±3.6比45.4±5.2，均P<0.05)水平升高。
　　2.AGM治療也能夠抑制ZYM引起的肺和小腸組織TNF-α(ng/L：245.7±39.1比378.3±67.6

5、，P<0.05)、IL-6(ng/L：810.3±175.6比1172.4±203.3，P<0.05)、MPO活性(ng/mg：24.9±4.4比37.3±5.8，P<0.05]。熒光顯微鏡觀察表明AGM減少酵母多糖誘導(dǎo)的肺和小腸組織凋亡的發(fā)生。酵母多糖注射導(dǎo)致肺和小腸組織嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)，包括血管擴(kuò)張、水腫及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)等，AGM治療后以上損傷均有明顯緩解。此外，與酵母多糖組相比，AGM治療組直接抑制肺組織NF-κB p65DNA結(jié)合

6、活性(吸光度值：0.272±0.029比0.347±0.037，P<0.05)。小腸組織中ZYM+PBS組和ZYM+AGM組之間無(wú)明顯差異。
　　3.與酵母多糖組相比，AGM治療后可降低酵母多糖引起的肺、肝及胰腺酶標(biāo)記物的升高。
　　4.體外實(shí)驗(yàn)，AGM可抑制IL-6、TNF-α的產(chǎn)生，輕微增加IL-10的產(chǎn)生。
　　結(jié)論：
　　1.AGM能夠拮抗ZYM誘導(dǎo)的小鼠局部和全身炎癥因子IL-6、TNF-α、NO的產(chǎn)生