植酸對二甲肼誘導的結(jié)直腸癌大鼠模型腸粘膜機械屏障的影響.pdf

1、目的：通過建立二甲肼（DMH）誘導的結(jié)直腸癌大鼠模型，觀察不同劑量植酸干預對結(jié)直腸癌大鼠腸粘膜機械屏障粘液層MUC2和TFF3蛋白及三種緊密連接蛋白的影響，探討植酸對結(jié)直腸癌大鼠模型腸粘膜機械屏障的作用機制。
　　方法：60只 Wistar雄性大鼠按體重隨機區(qū)組分為正常對照組(NC)、模型組(MG)、植酸低劑量組（PL）、植酸中劑量組(PM)和植酸高劑量組(PH)。各植酸作用組每天分別給予0.25g/kg、0.5g/kg和1g/k

2、g的植酸鈉灌胃，NC和MG組灌胃等體積生理鹽水。實驗第5周起，除NC組外，其余各組大鼠頸背部注射劑量為30mg/kg的DMH持續(xù)18周，期間NC組注射等體積生理鹽水。繼續(xù)植酸鈉灌胃至實驗39周，處死大鼠。取 NC組結(jié)腸組織及其他組結(jié)直腸腫瘤，免疫組化的方法檢測其zo-1和occludin蛋白的表達情況；Western Blot方法檢測MUC2、TFF3和claudin-1蛋白的表達情況；實時定量PCR方法檢測MUC2、TFF3和clau

3、din-1 mRNA的表達情況；酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測血清中D-乳酸（D-LA）和內(nèi)毒素（LPS）的表達情況。
　　結(jié)果：實驗結(jié)束時，模型組和植酸各劑量組均發(fā)生結(jié)直腸腫瘤，其中，模型組與植酸低劑量組腫瘤發(fā)生率均為100%，植酸中、高劑量組腫瘤發(fā)生率下降，分別為88.9%和66.7%；與對照組比較，模型組zo-1和occludin蛋白的表達明顯降低（P＜0.05），植酸干預后，結(jié)直腸腫瘤中zo-1和occludin蛋白的表

4、達顯著升高（P＜0.05）；DMH誘導使得MUC2和TFF3蛋白表達明顯降低（P＜0.05），claudin-1蛋白表達明顯升高（P＜0.05），經(jīng)植酸作用，各植酸組 MUC2蛋白表達均明顯升高（P＜0.05），植酸中、高劑量組 TFF3的蛋白表達明顯升高（P＜0.05），且植酸中、高劑量組claudin-1蛋白的表達顯著降低（P＜0.05）；MUC2和claudin-1 mRNA表達水平的變化趨勢與其對應(yīng)的蛋白變化一致，而各植酸作用組

5、 TFF3 mRNA的表達水平與模型組相比均明顯升高（P＜0.05）。與對照組相比，模型組大鼠血清中D-LA和LPS的表達明顯升高（P＜0.05），各植酸作用組顯著降低 D-LA和 LPS的表達（P＜0.05）。
　　結(jié)論：（1）.植酸可以改善 DMH誘導的腸粘膜損傷，保護腸粘膜機械屏障，減少DMH誘導的大鼠結(jié)直腸腫瘤的發(fā)生率。
　　（2）植酸通過上調(diào)腸粘膜粘液層中MUC2和TFF3蛋白及mRNA的表達水平來改善粘液層的屏障