CGMP對(duì)結(jié)直腸癌大鼠細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的影響及對(duì)Ⅱ相酶的誘導(dǎo)水平的研究.pdf

1、結(jié)直腸癌是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在全世界范圍內(nèi)其發(fā)病率居第3位，死亡率居第4位。隨著人口的老齡化和生活方式的演變，世界結(jié)直腸癌的發(fā)病率以每年2％的速度遞增，而中國(guó)的增速則為3.9％，明顯高于世界平均水平，目前已位居我國(guó)惡性腫瘤死因順位第4至第5位。結(jié)直腸癌的發(fā)生在臨床上是一個(gè)漫長(zhǎng)的過(guò)程，其發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移是一個(gè)多因素參與多階段發(fā)展的復(fù)雜過(guò)程，是多種因素長(zhǎng)期作用的結(jié)果。深入研究結(jié)直腸癌發(fā)病的機(jī)制并進(jìn)行干預(yù)治療，則可能改變目前結(jié)直腸癌的預(yù)防及

2、篩查策略，具有廣闊前景。從天然資源中尋找特異性高、活性強(qiáng)、毒副反應(yīng)小且使用面廣的抗腫瘤新藥研究已廣泛開(kāi)展。酪蛋白糖巨肽作為一種食源性生物活性肽，具有很大開(kāi)發(fā)價(jià)值。它有很多生物活性，如調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)反應(yīng)、促進(jìn)雙歧桿菌增殖、結(jié)合霍亂菌素和埃希氏大腸桿菌腸毒素、抑制流感病毒紅細(xì)胞凝集素、抑制胃腸道分泌物等，其與抗腫瘤的關(guān)系已引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。
　　 為了了解CGMP對(duì)大鼠結(jié)直腸癌異型隱窩灶、細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)、腸黏膜屏障功能的影響，本實(shí)驗(yàn)

3、選取健康的雄性Wistar大鼠，分成五組:正常對(duì)照組，模型對(duì)照組，低劑量CGMP組、中劑量CGMP組、高劑量CGMP組。其中正常對(duì)照組不進(jìn)行任何處理，模型對(duì)照組腹腔注射二甲肼，中、低、高劑量組在腹腔注射二甲肼的同時(shí)，灌胃不同劑量的CGMP，分別為10 mg/(kg·d)、50 mg/(kg·d)、100mg/(kg·d)，連續(xù)注射和灌胃15周后，處死各組大鼠，取其結(jié)腸組織和血清，首先檢測(cè)結(jié)腸末端異型隱窩灶個(gè)數(shù)，然后利用液相芯片法檢測(cè)結(jié)腸

4、組織和血清中的細(xì)胞因子水平，并利用免疫組化技術(shù)檢測(cè)TFF3和VEGF的表達(dá)情況。另外，為了探討CGMP對(duì)人類(lèi)結(jié)腸癌細(xì)胞HT29的抑制作用及對(duì)Ⅱ相酶谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的誘導(dǎo)水平，本實(shí)驗(yàn)采用MTT法檢測(cè)分析不同濃度CGMP干預(yù)后HT29細(xì)胞的活力，并分析谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的活性。
　　 結(jié)果:(1) CGMP對(duì)結(jié)直腸癌大鼠體質(zhì)量影響沒(méi)有顯著性差異，CGMP可顯著抑制異型隱窩灶的形成，且異型隱窩灶個(gè)數(shù)呈劑量依賴(lài)性降低，CGMP對(duì)結(jié)直腸

5、癌大鼠內(nèi)毒素和活性氧簇的水平具有顯著的抑制作用，其抑制作用呈劑量依賴(lài)趨勢(shì)。(2)CGMP可以顯著抑制結(jié)直腸癌大鼠體內(nèi)Th1/Th2類(lèi)細(xì)胞因子的失衡，且呈劑量依賴(lài)趨勢(shì)。(3)免疫組化檢測(cè)TFF3和VEGF的表達(dá):TFF3在正常對(duì)照組高表達(dá)，VEGF在正常對(duì)照組低表達(dá)，與模型對(duì)照組相比，CGMP各劑量組促進(jìn)了TFF3的表達(dá)，降低了VEGF的表達(dá)，且以中劑量效果最佳。(4) CGMP濃度在10-1～10-4mg/mL范圍內(nèi)時(shí)，對(duì)HT29細(xì)胞的

6、抑制作用處于上升趨勢(shì)。CGMP可以誘導(dǎo)谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶，其最佳作用時(shí)間為6h，最佳濃度為10-3 mg/mL。
　　 結(jié)論:CGMP具有改善結(jié)直腸癌大鼠結(jié)腸組織損傷的功能，其機(jī)制為CGMP可以有效抑制結(jié)直腸癌大鼠體內(nèi)異型隱窩灶的形成，并呈劑量依賴(lài)性，而且CGMP可以下調(diào)大鼠體內(nèi)IL-4等Th2類(lèi)細(xì)胞因子的異常升高，促進(jìn)IL-2等Th1類(lèi)細(xì)胞因子的分泌，改善大鼠體內(nèi)處于失衡狀態(tài)的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)，同時(shí)還可以顯著抑制大鼠結(jié)腸黏膜VEG