骨髓增生異常綜合征患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞遺傳學(xué)特征的研究.pdf

1、目的：骨髓增生異常綜合征是骨髓造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病，其起病及進(jìn)展是由于造血干/祖細(xì)胞形成優(yōu)勢(shì)惡性克隆而發(fā)病，本病生物學(xué)特征和發(fā)病機(jī)制是復(fù)雜的，造血微環(huán)境與造血細(xì)胞之間存在復(fù)雜的相互作用參與其無效造血過程，作為造血微環(huán)境關(guān)鍵組分骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有類似的遺傳易感性及受損因素，其克隆是否受累，并藉此影響微環(huán)境生理功能導(dǎo)致調(diào)控造血異常而發(fā)病及進(jìn)展，本研究通過建立MDS患者及正常對(duì)照的貼壁培養(yǎng)體系，體外分離擴(kuò)增BMSC，初步評(píng)價(jià)MDS患者B

2、MSC的生物學(xué)特征，包括形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)表型及培養(yǎng)特征，并對(duì)分離所得BMSC細(xì)胞遺傳學(xué)特征進(jìn)行分析，為BMSC是否參與MDS發(fā)病提供論據(jù)。
　　 方法：收集我院血液科連續(xù)收治初診的22例MDS患者作為試驗(yàn)組及7例正常體檢者作為對(duì)照，建立貼壁培養(yǎng)體系，分離擴(kuò)增BMSC，根據(jù)形態(tài)學(xué)特征及流式細(xì)胞儀檢測(cè)表面抗原進(jìn)行鑒定，初步分析MDS的BMSC的培養(yǎng)及細(xì)胞特征。進(jìn)一步通過同時(shí)對(duì)造血細(xì)胞和BMSC進(jìn)行胰酶-Giemsa技術(shù)(GTG)顯帶。

3、根據(jù)ISCN(2005)要求，進(jìn)行核型分析，并比較兩者間的細(xì)胞遺傳學(xué)特征。
　　 結(jié)果：本研究組成功建立了體外培養(yǎng)分離擴(kuò)增體系，經(jīng)光鏡、細(xì)胞化學(xué)染色流式細(xì)胞儀鑒定，證實(shí)MDS的BMSC具有典型的細(xì)長紡錘形的形態(tài)學(xué)特征及表達(dá)CD29，CD73，CD90反之不表達(dá)CD34，CD45，ALP非造血細(xì)胞的抗原特征，并初步評(píng)價(jià)其細(xì)胞培養(yǎng)特征顯示其體外細(xì)胞擴(kuò)增傳代時(shí)間，細(xì)胞所獲中期分裂相與正常對(duì)照組比較無差異。明確了MDS患者BMSC也存在

4、細(xì)胞遺傳學(xué)畸變(64％)，以染色體物質(zhì)不平衡畸變多見，尤其是缺失多見(92％)，其中克隆性缺失7例，占50％。并發(fā)現(xiàn)高比例的隨機(jī)丟失，不排除是其遺傳學(xué)不穩(wěn)定性的特征。HC與BMSC間沒有出現(xiàn)完全一致的畸變類型，HC正常核型的患者同樣也可存在畸變3例(33％)顯著低于異常核型患者比例(92％)。
　　 結(jié)論：MDS患者BMSC具有典型的細(xì)長紡錘形的形態(tài)學(xué)特征及抗原特征，MDS患者BMSC體外增生及分裂增殖能力與正常對(duì)照無異。但存在

5、細(xì)胞遺傳學(xué)畸變。染色體物質(zhì)不平衡畸變可能是其遺傳學(xué)不穩(wěn)定的標(biāo)記，非造血起源的BMSC顯示有別于HC的畸變類型，提示兩者遺傳易感性相似但不完全相同。研究結(jié)果可間接的反應(yīng)MDS患者BMSC存在功能性改變，盡管BMSC的染色體畸變可能沒有直接影響MDS克隆染色體畸變的類型，但是毋容置疑其在MDS發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。BMSC顯示的染色體畸變提示了其增強(qiáng)了MDS患者的遺傳易感性及BMSC在MDS發(fā)病機(jī)制中潛在作用，有助于我們進(jìn)一步認(rèn)識(shí)該疾病生