納米靶向遞藥系統(tǒng)AS1411-PLGa-DOX的構建及其對腦膠質瘤的治療作用與機制研究.pdf

1、背景:
　　惡性腫瘤給人類健康和社會發(fā)展帶來了沉重的傷害。由于腫瘤呈侵襲性生長，手術難以完全根除，加之放療、化療的毒副作用大，因此，尋找最佳的是腫瘤綜合治療的手段迫在眉睫。隨著材料學、生物醫(yī)學及納米科學的交叉融合，納米靶向制劑逐漸引起科學家的重視。納米靶向給藥系統(tǒng)是目前研究的熱點，它具有可靶向性，提高藥物穩(wěn)定性及緩釋性等特點。
　　聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)被廣泛用于載藥系統(tǒng)的研究，主要是由于具有生物相容性、低毒性和

2、可降解性等良好的特性。鹽酸多柔比星（又稱阿霉素，DOX），對多種腫瘤均具有顯著的抑制作用，它但它的骨髓抑制、心臟損傷等不良反應成為DOX治療腫瘤的瓶頸。核酸適配體(AS1411)具有特異性強的靶標結合能力、易于穿透腫瘤組織、易于體外修飾等優(yōu)點，并特異性結合于核仁蛋白(C23)，以發(fā)揮其抗腫瘤的重要作用。C23是細胞凋亡相關蛋白，它可調控細胞增殖生長過程，其中p38絲裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)在細胞凋亡的過程所起的重要作用越來越來

3、引起廣大科學研究者的重視。
　　目的:
　　本課題以DOX為抗腦膠質瘤藥物，以PLGA為納米載體，AS1411偶聯(lián)于PLGA納米微球，以構成納米靶向遞藥系統(tǒng)AS1411-PLGA-DOX，以發(fā)揮其特異性靶向抗腦膠質瘤的作用，并進一步明確其抗腦膠質瘤作用的分子機制。
　　方法:
　　采用復乳乳化溶劑揮發(fā)法及碳二亞胺兩步縮合反應法進行AS1411-PLGA-DOX的制備;并對其進行表征;再從體內外兩方面明確AS141

4、1-PLGA-DOX抗腦膠質瘤的作用;最后從分子生物學方面，以腫瘤凋亡的分子機制為著眼點，深入研究AS1411-PLGA-DOX抗腦膠質瘤的內在分子機制。
　　結果:
　　1.AS1411-PLGA-DOX為球形的納米粒，大小(245±42.6nm)分布較規(guī)整，表面較光滑;多分散系數(shù)0.212±0.023，電位-36.2±1.8mV，LC％為1.72±0.06％、EE％為88.1±4.7％;體外釋放性為47.7±3.9.％(

5、pH=7.4)，57.0±4.6％(pH=5)，其結果展現(xiàn)出具有pH響應性釋放的特性;溶血率為0.244％以展現(xiàn)出良好的生物形容性。同時，AS1411-PLGA-DOX的熒光強度顯著高于PLGA-DOX，且被細胞攝入內部并釋藥，細胞定量定位的結果表明其具有一定的靶向性。
　　2.體外實驗表明，AS1411-PLGA-DOX對U87細胞生長抑制率的變化呈現(xiàn)濃度依賴性，并可將細胞阻滯于G2/M，S期，其抑制腫瘤的機制可能與AS1411

6、-PLGA-DOX激活p38MAPK通道，上調p38的表達，下調C23、Bcl-2、Bcl-XL的表達有關。
　　3.體內實驗表明，AS1411-PLGA-DOX可抑制皮下荷瘤裸鼠的瘤體生長，延長荷瘤裸鼠的生存時間，其進一步的分子生物學機制與細胞實驗相一致。
　　結論:
　　本課題已成功構建具有靶向作用的納米遞藥系統(tǒng)AS1411-PLGA-DOX，同時其體內外實驗結果表明，AS1411-PLGA-DOX是一種有潛在開發(fā)