健腦益智膠囊對(duì)TBI后大鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬區(qū)CaMKⅡ表達(dá)的影響.pdf

1、目的:通過觀察不同干預(yù)條件下不同組別的顱腦損傷（Traumatic brain injuries，TBI）后大鼠空間辨別性學(xué)習(xí)記憶能力改變，海馬神經(jīng)元形態(tài)改變及CaMKⅡ表達(dá)的影響，進(jìn)一步探討基于“豁痰化瘀利水”大法的健腦益智膠囊對(duì)TBI后大鼠空間辨別性學(xué)習(xí)記憶能力改變以及海馬神經(jīng)元形態(tài)改變、CaMKⅡ的表達(dá)是否具備干預(yù)效應(yīng)。
　　方法：選SD大鼠（8周齡）180只，隨機(jī)劃分為5大組，分別為A（假手術(shù)組）、B組（模型組）、C組（中

2、藥組）、D組（腦復(fù)康組）、E組（空白組）。單組按采集腦組織標(biāo)本的時(shí)序分為例如A1-A5的亞組；造模均采用電子顱腦損傷儀(eCCI)進(jìn)行TBI造模，A組（顱骨鉆孔術(shù)后見完整硬膜，不打擊）；B組（造模后常規(guī)喂養(yǎng)，不予處理）；C組（造模后，給以中藥健腦益智膠囊灌胃，給藥3次/日，配置規(guī)格：0.75g/ml混懸液）；D組（造模后，給以西醫(yī)腦復(fù)康片灌胃，給藥3次/日，配置規(guī)格：0.09g/ml混懸液）；E組（僅給予常規(guī)喂養(yǎng)）。運(yùn)用行為學(xué)檢查法水迷

3、宮(Morris water maze）記錄造模前及造模后給予相應(yīng)干預(yù)的模型大鼠在第24h、3d、5d、7d、14d的逃避潛伏期和穿越平臺(tái)次數(shù)等行為學(xué)指標(biāo)的影響，并在規(guī)定節(jié)點(diǎn)24h、3d、5d、7d、14d后在相應(yīng)亞組采集腦組織標(biāo)本，進(jìn)行HE染色，鏡下觀察攝片，部分用CaMKⅡ免疫組化分析。
　　結(jié)果：本次實(shí)驗(yàn)造模成功，按照NSS評(píng)分篩選，大鼠腦功能均中重度缺損?？偣仓滤?8只大鼠（致死率27.0％）。所有大鼠造模前均腦功能完整，

4、造模后，首日均表現(xiàn)學(xué)習(xí)和記憶能力變差。
　　1.水迷宮結(jié)果:模型組大鼠在各時(shí)間點(diǎn)逃避潛伏期明顯長(zhǎng)于其他各組，穿越平臺(tái)次數(shù)明顯小于其他各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；第24h-3d內(nèi)B、C、D兩兩比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。第5天，B組和C組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.05），C組優(yōu)于B組；B組和D組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p>0.05）；C組與D組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p>0.05）。第7天，B組與C組、D組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但C組與D無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。第14天

5、B、C、D三組比較兩兩均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其中潛伏期時(shí)間B組>A組>D組>C組，穿越平臺(tái)次數(shù)B組　　2.HE染色24h-5d可見挫傷灶細(xì)胞周圍見大量液化壞死、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，C、D組較其他組有神經(jīng)元和微血管數(shù)量較多。7-14天時(shí)發(fā)現(xiàn)水腫較前減輕，但仍有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及膠質(zhì)細(xì)胞增生，C組、D組神經(jīng)元及周圍微血管數(shù)量均高于模型組；
　　3.腦損傷后不同時(shí)間CaMKII平均光

6、密度值比較：A和E組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，B、C、D組大鼠的腦組織標(biāo)本中在24h-3d內(nèi)可檢測(cè)到CaMKll的高度表達(dá)，無明顯差異（p>0.05）。5天再次檢測(cè)發(fā)現(xiàn)各組大鼠腦組織內(nèi)CaMKll細(xì)胞陽性率開始下降，B組和C組有差異（p<0.05），C組優(yōu)于B組；B組和D組無差異（p>0.05），C組與D組無差異（p>0.05）。7-14天檢測(cè)發(fā)現(xiàn)B組CaMKll表達(dá)水平仍高于其他各組，B、C、D組兩兩比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.05），其中平均光密

7、度值B組>D組>C組>A組,有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.健腦智膠益囊可以使TBI后大鼠學(xué)習(xí)記憶神經(jīng)行為學(xué)有所改善，在行為學(xué)宏觀上說明了其對(duì)學(xué)習(xí)記憶障礙的治療作用；
　　2.健腦智膠益囊可能通過促進(jìn)海馬區(qū)神經(jīng)元再生和穩(wěn)定內(nèi)環(huán)境，促進(jìn)神經(jīng)元和微血管數(shù)量增加，從而改善學(xué)習(xí)記憶障礙；
　　3.健腦益智膠囊可抑制CaMKⅡ表達(dá),可能誘導(dǎo)該酶恢復(fù)活性,減輕或抑制神經(jīng)元損傷和保護(hù)腦功能以及促進(jìn)損傷后