重型再生障礙性貧血患者外周血自然殺傷細(xì)胞亞群數(shù)量及功能變化的研究.pdf

1、目的：
　　 分析重型再生障礙性貧血(SAA)患者免疫抑制治療(IST)前、后外周血自然殺傷(NK)細(xì)胞及其亞群占外周血淋巴細(xì)胞百分比、功能變化及其與造血功能相關(guān)性，探討NK細(xì)胞在SAA發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　 方法：
　　 用單克隆抗體四標(biāo)法和流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)42例SAA患者[初治12例(初治組)、IST后恢復(fù)30例(恢復(fù)組)]外周血NK細(xì)胞(CD3-CD56+/CD16+)及其亞群[CD56brigh

2、t(CD3-CD56brightCD16neg/dim)、CD56dim(CD3-CD56dimCD16bright)、CD3-CD56negCD16bright]占淋巴細(xì)胞的百分比、NK細(xì)胞胞膜抑制性受體(CD158a和CD158b)、NK細(xì)胞胞膜活化性受體(NKG2D和NKp46)及NK細(xì)胞胞漿穿孔素、顆粒酶B的表達(dá)，并與13名正常對(duì)照(對(duì)照組)做比較。分析上述變化與SAA患者外周血中性粒細(xì)胞百分比(ANC％)、淋巴細(xì)胞百分比(Ly

3、m％)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(Ret)及骨髓造血功能(增生程度、粒系百分比、紅系百分比、巨核細(xì)胞數(shù)量、淋系百分比)的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：
　　 1.SAA患者外周血NK細(xì)胞及其亞群占淋巴細(xì)胞百分比的變化
　　 ①SAA患者NK細(xì)胞百分比的變化初治組、恢復(fù)組、對(duì)照組NK細(xì)胞百分比分別為(10.30±6.08)％、(16.47±8.29)％、(19.45±6.88)％，初治組明顯低于恢復(fù)組和對(duì)照組(均p<0.05)，恢復(fù)

4、組與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 ②SAA患者CD56brightNK細(xì)胞亞群百分比的變化初治組、恢復(fù)組、對(duì)照組CD56brightNK細(xì)胞亞群百分比的中位數(shù)分別為0.11％、0.68％、0.53％，初治組明顯低于恢復(fù)組和對(duì)照組組(均p<0.05)，恢復(fù)組與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。
　　 ③SAA患者CD56dim NK細(xì)胞亞群百分比的變化初治組、恢復(fù)組、對(duì)照組CD56dim N

5、K細(xì)胞亞群百分比分別為(9.62±6.04)％、(1.3.81±7.52)％、(18.21±7.16)％，初治組明顯低于對(duì)照組(p<0.05)，初治組與恢復(fù)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)，恢復(fù)組與對(duì)照組比較差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。
　　 ④SAA患者CD3-CD56negCD16brighNK細(xì)胞亞群百分比的變化初治組、恢復(fù)組、對(duì)照組CD3-CD56negCD16bright NK細(xì)胞亞群百分比的中位數(shù)分別為

6、0.37％、0.79％、0.41％，恢復(fù)組明顯高于初治組及對(duì)照組(均p<0.05)，初治組與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。
　　 2.SAA患者外周血NK細(xì)胞功能的變化
　　 ①SAA患者NK細(xì)胞胞膜受體表達(dá)的變化SAA初治組NK細(xì)胞胞膜CD158a、NKG2D、NKp46中位表達(dá)陽(yáng)性率分別為16.45％、95.68％、88.23％，SAA恢復(fù)組為19.34％、96.85％、82.97％，對(duì)照組為21.59

7、％、96.13％、40.99％，初治組與恢復(fù)組NKp46表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組(均p<0.05)；初治組、恢復(fù)組、對(duì)照組NK細(xì)胞胞膜CD158b表達(dá)陽(yáng)性率分別為(34.66±16.02)％、(39.13±17.75)％、(41.43±17.43)％，各組之間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均p>0.05)。
　　 ②SAA患者NK細(xì)胞胞漿穿孔素、顆粒酶B表達(dá)的變化初治組、恢復(fù)組、對(duì)照組NK細(xì)胞胞漿穿孔素表達(dá)陽(yáng)性率分別為(64.97±2

8、1.61)％、(66.14±20.73)％、(42.11±27.25)％，初治組與恢復(fù)組均明顯高于對(duì)照組(均p<0.05)，初治組與恢復(fù)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)；初治組、恢復(fù)組、對(duì)照組NK細(xì)胞胞漿顆粒酶B表達(dá)的中位陽(yáng)性率分別為96.43％、96.97％、92.88％，各組之間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均p>0.05)。
　　 3.SAA患者外周血NK細(xì)胞及亞群占淋巴細(xì)胞百分比、功能與造血功能的相關(guān)性
　　 ①

9、SAA患者NK細(xì)胞及其亞群百分比與造血功能的相關(guān)性NK細(xì)胞百分比與SAA患者ANC％、骨髓增生程度、骨髓粒系及紅系百分比呈正相關(guān)(r分別為0.423、0.455、0.357、0.340，均p<0.05)，與Lym％、骨髓淋系百分比呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.411、-0.522，均p<0.05)；CD56brightNK細(xì)胞亞群百分比與SAA患者ANC％、骨髓增生程度、骨髓的粒系百分比及巨核細(xì)胞數(shù)量呈關(guān)正相關(guān)(r分別為0.609、0.412

10、、0.517、0.362，均p<0.05)，與骨髓淋系百分比呈負(fù)相關(guān)(r=-0.435，p<0.05)；CD56dimNK細(xì)胞亞群百分比與SAA患者骨髓增生程度呈正相關(guān)(r=0.404，p<0.05)，與骨髓淋系百分比呈負(fù)相關(guān)(r=-0.411，p<0.05)；CD3-CD56negCD16brightNK細(xì)胞亞群百分比與SAA患者ANC％、Ret、骨髓增生程度、骨髓粒系百分比呈正相關(guān)(r分別為0.468、0.328、0.451、0.4

11、34，均p<0.05)，與Lym％、骨髓淋系百分比呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.389、-0.547，均p<0.05)。
　　 ②SAA患者NK細(xì)胞功能與造血功能的相關(guān)性NK細(xì)胞的CD158a、CD158b、NKG2D、NKp46、穿孔素、顆粒酶B表達(dá)與前述各造血功能指標(biāo)均無(wú)相關(guān)性(均p>0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 SAA患者外周血NK細(xì)胞、CD56bright、CD56dimNK細(xì)胞亞群占淋巴細(xì)胞百分比降低可能