替尼泊苷納米乳的制備及藥學(xué)相關(guān)研究.pdf

1、替尼泊苷(Teniposide)又稱足葉噻吩苷,抗瘤譜廣、毒性低,對(duì)小細(xì)胞肺癌、惡性淋巴瘤、睪丸癌、急性白血病等多種癌癥均有良好的療效。替尼泊苷幾乎不溶于水,口服生物利用度低。目前有注射劑,不良反應(yīng)多,可導(dǎo)致嚴(yán)重的過敏反應(yīng),而且靜脈注射時(shí)滲漏可導(dǎo)致皮膚灼傷。因此,本文制備了替尼泊苷納米乳,用于提高其口服吸收的研究。
　　 本文建立了替尼泊苷體外HPLC分析方法,在0.4～80.0mg/L范圍內(nèi),替尼泊苷峰面積和濃度成良好的線性關(guān)

2、系,且專屬性強(qiáng),精密度、回收率均符合分析要求,可以用于替尼泊苷含量測(cè)定、替尼泊苷納米乳的質(zhì)量評(píng)價(jià).建立了替尼泊苷體內(nèi)HPLC分析方法,在0.1～20.0mg.L-1范圍內(nèi),替尼泊苷血漿樣品峰面積和濃度成良好的線性關(guān)系,此方法操作簡(jiǎn)單,專屬性強(qiáng),精密度、回收率均符合要求,可以用于胃腸道吸收特性及組織分布測(cè)定的需要。以小檗堿為內(nèi)標(biāo)建立了替尼泊苷體內(nèi)HPLC-MS/US分析方法,在1.00-1000ng-mL-1范圍內(nèi),線性關(guān)系良好,專屬性強(qiáng)

3、,精密度、回收率均符合要求,可以用于體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)及淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)的測(cè)定。
　　 本文采用薄膜-水化法制備了替尼泊苷納米乳(TSN),以包封率為評(píng)價(jià)指標(biāo),采用正交設(shè)計(jì)考察藥物與中鏈油之比、聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯與聚乙二醇十二羥基硬脂酸酯之比、水化溫度、成膜時(shí)圓底燒瓶與旋轉(zhuǎn)軸的傾斜角度四個(gè)因素對(duì)包封率的影響,對(duì)TSN的處方和制備工藝進(jìn)行優(yōu)化。對(duì)TSN表征結(jié)果:粒子均勻圓整,TSN平均粒徑為31.19±4.11nm,Zeta電位為-

4、10.1±0.5mv。HPLC測(cè)定其包封率為99.25％,載藥量為2.20%,且凍干前后,TSN質(zhì)量穩(wěn)定。替尼泊苷包載于TSN后,主要以分子狀態(tài)或無定形態(tài)存在,在人工腸液中釋放較快。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究表明TSN能夠顯著增加替尼泊苷的抗腫瘤效果,并且顯著改變腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期?？疾炝薚SN灌胃給藥后在胃腸道部位的吸收情況,在給藥后的4h內(nèi)主要分布于胃、十二指腸、空腸部位,為了進(jìn)一步研究在胃腸道中的吸收特性,采用激光掃描共聚焦顯微鏡觀察紅色熒光標(biāo)

5、記的TSN在灌胃給藥0.5h后各個(gè)部位的攝取,胃和十二指腸最多,空腸次之,回腸和結(jié)腸幾乎沒有。采用Caco-2細(xì)胞模型進(jìn)一步研究TSN在小腸細(xì)胞中的攝取機(jī)制,結(jié)果表明TSN能夠顯著提高替尼泊苷在小腸細(xì)胞中的攝取,而且4℃下TSN的攝取量?jī)H為37℃下攝取量的13%,加入細(xì)胞內(nèi)吞途徑抑制劑Chlorpromazine后細(xì)胞攝取降低了30%,而加入Filipin后細(xì)胞攝取無顯著性變化。因此TSN主要通過網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑攝取進(jìn)入小腸細(xì)胞。

6、考察了TSN從胃腸道吸收后的轉(zhuǎn)運(yùn)情況,結(jié)果表明加入淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑后其體內(nèi)吸收降低了近70%,因此TSN主要通過淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)途徑吸收進(jìn)入體循環(huán)。
　　 采用SD大鼠進(jìn)行了TSN的藥動(dòng)學(xué)研究,TSN和對(duì)照的達(dá)峰時(shí)間分別為1.0h和0.5h,最大峰濃度分別為969.0和170.75ng.mL-1,提高了5.67倍,AUC0-∞(ng.h.mL-1)提高了5.47倍。組織分布結(jié)果研究表明TSN能夠顯著提高藥物在各組織器官中的分布,并且能夠靶