雷公藤多苷干預舒尼替尼引起的小鼠腎足細胞凋亡及相關蛋白表達的機制研究.pdf

1、目的：
　　本研究旨在通過體外實驗研究雷公藤多苷（TWP）干預抗血管生成藥物舒尼替尼對小鼠腎足細胞的影響并探討其可能的機制，為進一步動物實驗及臨床藥物研究提供理論基礎及數(shù)據(jù)支持。
　　方法：
　?。?）體外培養(yǎng)小鼠腎足細胞，采用MTT法檢測舒尼替尼單藥在不同濃度和不同時間下對小鼠腎足細胞的增殖抑制作用，以及雷公藤多苷干預時對小鼠腎足細胞增殖抑制率的影響。（2）采用流式細胞術Annexin-V APC/7-AAD雙染法檢

2、測不同分組給藥作用48h后小鼠腎足細胞的凋亡情況；（3）通過Western blot法檢測不同分組藥物作用48h后小鼠腎足細胞裂孔膜相關蛋白Nephrin，CD2AP的表達情況；（4）采用免疫熒光法觀察不同藥物分組足細胞相關蛋白Nephrin，CD2AP表達及分布情況。
　　結果：
　?。?）不同濃度舒尼替尼作用24，48，72h后，小鼠腎足細胞增殖抑制率隨著藥物濃度及作用時間的增加而增高，呈現(xiàn)濃度依賴性和時間依賴性，TWP

3、+舒尼替尼組與舒尼替尼單藥組相比48h增殖抑制率降低，而24，72h差異無統(tǒng)計學意義。（2）舒尼替尼組凋亡率高于對照組，且凋亡率隨濃度增加而增高，TWP+舒尼替尼組凋亡率低于舒尼替尼單藥組。（3）不同分組藥物作用48h后足細胞裂孔膜相關蛋白Nephrin，CD2AP表達量，舒尼替尼組較對照組降低，TWP+舒尼替尼組較舒尼替尼單藥組增高。(4)舒尼替尼組小鼠腎足細胞蛋白Nephrin，CD2AP表達較對照組降低，且舒尼替尼組 Nephri

4、n蛋白分布面積縮小，主要分布在細胞核周邊，呈現(xiàn)細小顆粒狀，而對照組為連續(xù)均勻分布；TWP+舒尼替尼組蛋白Nephrin，CD2AP表達較舒尼替尼組增高。
　　結論：
　?。?）在體外實驗中，舒尼替尼對小鼠腎足細胞具有增殖抑制作用，并可誘導小鼠腎足細胞凋亡；雷公藤多苷干預時可保護小鼠腎足細胞，降低舒尼替尼導致的小鼠腎足細胞增殖抑制率和凋亡。（2）在體外實驗中，舒尼替尼可下調足細胞裂孔膜相關蛋白 Nephrin，CD2AP的表達