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文檔簡介
1、本論文共分4個試驗研究了維生素A過量對肉雞鈣、磷沉積及堿性磷酸和骨鈣素基因表達的影響。試驗1~試驗3利用體內法,采用單因子完全隨機試驗設計,將1日齡健康愛拔益加(AA)肉雞(公母各半H50只,隨機分為5個日糧處理組,每個處理組6個重復,每個重復組15只雞,試驗期42天。以玉米和豆粕為主要原料配制基礎日糧(基礎日糧中不添加維生素A),5種試驗日糧分別是在基礎日糧中添加:3000、6000、15000、30000和60000 IU/kg的維
2、生索A配制而成。試驗1通過研究過量維生素A對肉雞血清鈣、磷及脛骨鈣、磷含量、脛骨BMD及脛骨灰分的影響,進一步驗證過量維生素A對肉雞鈣、磷沉積的影響。試驗2主要通過研究維生素A過量對肉雞鈣、磷沉積相關激素及骨形成標志物的影響,探討了維生素A過量對肉雞鈣、磷沉積的影響機制。試驗3主要通過研究維生素A過量對肉雞脛骨、肝臟及小腸組織中ALP mRNA和BGP mRNA相對表達量的影響,探討了過量維生索A對肉雞鈣、磷沉積影響的分子機理,試驗4利
3、用體外細胞培養(yǎng)法,研究了不同濃度維生素A(0,0.03,0.10,0.30,1.00,2.00,6.00,12.00,24.00μg/ml對肉雞顱骨成骨細胞分泌功能及ALP,RNA和BGPmRNA相對表達量的影響,從成骨細胞活性的角度在細胞水平和分子水平上進一步探討了維生素A過量對肉雞鈣、磷沉積的影響機制。
在本研究的試驗條件下初步得出以下結果:
①肉雞脛骨鈣、磷沉積和脛骨強度與日糧維生素A水平呈顯著或趨于顯
4、著的劑量依賴關系(P<0.05;P<0.10]。其中,脛骨鈣磷沉積與脛骨強度以3000- 6000 IU/kg維生素A組較高:30000~60000IU/kg維生素A組較低;日糧維生素A水平為15000IU/kg時,脛骨鈣、磷沉積與脛骨強度也呈一定降低趨勢。
②日糧維生素A水平在3000-60000IU/kg范圍內,日糧維生素A水平以劑量依賴模式影響肉雞的血清PTH、CT、1,25(OH)2D3、BOP與PINP濃度及血清
5、ALP和BAP活性(P<0.05;P<0.10]。其中,30000-6000 IU/kg的高劑量維生素A引起肉雞血清中PTH濃度升高,CT與1,25(OH)2D3濃度及BGP與PINP濃度降低,ALP與BAP活性降低。
③隨日糧維生素A添加劑量的升高,肉雞脛骨、肝臟及小腸組織中ALPmRNA和BGP mRNA相對表達量均呈不同程度降低,二者呈顯著(P<0.05)或趨于顯著(P>0.10)的一次線性或二次曲線劑量依賴關系:其
6、表達量均以3000-6000 IU/kg維生素A日糧組較高,30000-60000 IU/kg維生索A日糧組較低,15000IU/kg維生素A日糧組居中。提示日糧維生素A過量可下調肉雞脛骨和肝臟及小腸組織中ALPmRNA和。BGP mRNA的相對表達量。
④隨培養(yǎng)液中維生素A水平的增加,肉雞成骨細胞培養(yǎng)液中ALP活性、BGP、PINP、OPN和OPG濃度呈顯著的一次線性降低(P<0.05)或二次曲線降低趨勢(P<0.10)
7、。提示維生素A水平以劑量依賴模式影響肉雞成骨細胞的功能和活性,適宜的維生素A水平可促進成骨細胞的活性,誘導其分化成熟,但高劑量的維生素A抑制成骨細胞的活性和分化成熟。
⑤隨培養(yǎng)液中維生素A水平的增加,成骨細胞ALPmRNA相對表達量呈顯著的一次線性或一元二次降低(P<0.05),BGP mRNA相對表達量呈一元二次降低趨勢(P<0.10)。提示維生素A以劑量依賴模式影響成骨細胞ALP mRNA與BOP mRNA相對表達量,
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