銅綠假單胞菌耐藥性與β-內(nèi)酰胺酶基因相關(guān)性研究.pdf

1、目的：調(diào)查青島地區(qū)醫(yī)院內(nèi)感染銅綠假單胞菌的耐藥現(xiàn)狀，并確定多重耐藥菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶基因種類，及酶活性與耐藥的關(guān)系。
　　 方法：采集臨床標(biāo)本，常規(guī)分離培養(yǎng)，采用MicroScan autoSCAN-4系統(tǒng)進(jìn)行菌種鑒定，儀器自動(dòng)分析15種抗生素最低抑菌濃度(MIC)濃度，藥敏結(jié)果判定符合臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI)標(biāo)準(zhǔn)，以敏感(S)、中介(I)、耐藥(R)報(bào)告結(jié)果。對(duì)疑似產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的銅綠假單胞菌分離株，采用紙片法進(jìn)行檢測

2、。初步確證銅綠假單胞菌產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶者，提取細(xì)菌基因組DNA，利用PCR技術(shù)檢測耐藥基因種類。采用反復(fù)凍融法提取β-內(nèi)酰胺酶，用頭孢噻吩法測定其活性，并分析酶活性與耐藥的關(guān)系。
　　 結(jié)果：收集臨床標(biāo)本分離到110株銅綠假單胞菌，并做臨床常用抗生素藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示對(duì)青霉素類、頭孢菌素類抗生素、頭霉素類抗生素頭孢西丁的耐藥率均較高；對(duì)碳青酶烯類抗生素亞胺培南耐藥率較低為21.82％，對(duì)氨基糖苷類抗生素阿米卡星及氨曲南的敏感率分別為

3、67.27％和43.64％。PCR試驗(yàn)檢測β-內(nèi)酰胺酶基因型，本研究中110株銅綠假單胞菌中，有68株擴(kuò)增出了TEM基因，24株擴(kuò)增出了SHV基因，4株擴(kuò)增出了GES基因，2株擴(kuò)增出了VIM基因，22株擴(kuò)增出了DHA基因，未擴(kuò)增出CTX-M-1和OXA基因，有74株缺失OprD-2基因。所有的銅綠假單胞菌均產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶，但不同菌株的酶活性不同，分析酶活性和實(shí)驗(yàn)菌株對(duì)抗生素的最低抑菌濃度(MIC)發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)酶活性高的菌株耐藥程度比較