銅綠假單胞菌的耐藥性及其多重耐藥株β-內(nèi)酰胺酶耐藥基因的研究.pdf

1、目的：
　　 了解臨床下呼吸道標(biāo)本中分離的銅綠假單胞菌對(duì)14種抗菌藥物的耐藥情況,為臨床合理使用抗生素提供參考。
　　 對(duì)多重耐藥銅綠假單胞菌進(jìn)行β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)及相關(guān)耐藥基因的研究。
　　 材料與方法:
　　 收集2009年安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院下呼吸道標(biāo)本中無(wú)重復(fù)分離的銅綠假單胞菌90株，所有菌株采用Microscan WalkAway-40全自動(dòng)微生物分析儀及其配套產(chǎn)品Negative Combo

2、 Panel Type 31(革蘭陰性復(fù)合板31)進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)。
　　 對(duì)篩選出的39株多重耐藥銅綠假單胞菌采用三維試驗(yàn)和EDTA協(xié)同實(shí)驗(yàn)檢測(cè)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）、AmpC酶和金屬β-內(nèi)酰胺酶（MBLs）。
　　 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)檢測(cè)18種β-內(nèi)酰胺酶耐藥基因及外膜蛋白OprD基因并進(jìn)行測(cè)序分析。
　　 結(jié)果：
　　 在體外藥敏試驗(yàn)中，氨基糖苷類抗菌藥物顯示出較高的敏感性，分別

3、為：阿米卡星（70％）、妥布霉素（68％）、慶大霉素（59％）；其次是環(huán)丙沙星（58％）、亞胺培南（56％）、左氧氟沙星（54％）、頭孢吡肟（50％）；哌拉西林/三唑巴坦、氧哌嗪青霉素、替卡西林/棒酸的耐藥率最高，達(dá)100％。
　　 三維試驗(yàn)結(jié)果顯示，7株產(chǎn)ESBLs(25.9％)，5株產(chǎn)AmpC酶(18.5％)，4株同時(shí)產(chǎn)ESBLs+AmpC酶(14.8％)，EDTA協(xié)同實(shí)驗(yàn)檢測(cè)4株產(chǎn)MBLs(14.8％)。
　　 P

4、CR結(jié)果顯示OXA-10陽(yáng)性7株，與三維試驗(yàn)結(jié)果相同，VIM-2陽(yáng)性2株，34株OprD基因缺失，其余基因均未檢出。
　　 結(jié)論：
　　 銅綠假單胞菌對(duì)臨床常用14種抗菌藥物均存在不同程度的耐藥現(xiàn)象，對(duì)氨基糖苷類、喹諾酮類抗菌藥物的敏感性較高；青霉素及含酶抑制劑的β-內(nèi)酰胺類抗生素在治療過(guò)程中可產(chǎn)生誘導(dǎo)酶，使細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性；第三代頭孢菌素、單環(huán)β-內(nèi)酰胺類因其較高的耐藥率，已不適宜治療臨床上銅綠假單胞菌引起的感染。

5、>　　 目前治療由銅綠假單胞菌引起的下呼吸道感染，可以首先選用氨基糖苷類及喹諾酮類抗菌藥物，其次是亞胺培南、第四代頭孢菌素，然而由于氨基糖苷類及喹諾酮類抗菌藥物存在腎毒性、耳毒性及中樞神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)等副作用，在治療過(guò)程中應(yīng)引起足夠重視。
　　 研究表明，攜帶OXA-10、VIM-2及OprD基因缺失是導(dǎo)致我院多重耐藥銅綠假單胞菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的重要機(jī)制。
　　 表型鑒定檢測(cè)MDRPA產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶，與PCR