與氰戊菊酯抗性相關的棉鈴蟲細胞色素P450基因的克隆及異源表達.pdf

1、　　一、氧化解毒代謝增強在棉鈴蟲對氰戊菊酯抗性中的作用　　該結果表明，氧化酶解毒代謝增強在YGF和YGYP兩個抗性品系對擬除蟲菊酯的抗性中均起主要作用，酯酶解毒代謝也參與其中。并證實了細胞色素P450氧化酶在棉鈴蟲對氰戊菊酯代謝抗性中的關鍵作用。 二、棉鈴蟲細胞色素P450O-脫甲基活性與對氰戊菊酯抗性的關系　　評價了六種增溶劑Chaps、Polyoxyethyleneetherw-1、膽酸鈉、Emulgen911、Emul

2、gen913、Triton-X100對YGF抗性品系棉鈴蟲細胞色素P450氧化酶O-脫甲基活性(PNOD)的影響，確定Polyoxyethyleneetherw-1可以作為棉鈴蟲細胞色素P450氧化酶PNOD活性檢測的有效增溶劑，從而改進了棉鈴蟲細胞色素P450氧化酶PNOD活性測定方法?！　〔捎酶倪M的棉鈴蟲細胞色素P450氧化酶PNOD測定方法，檢測了對氰戊菊酯具有不同抗性水平的5個棉鈴蟲品系的單頭4齡末期幼蟲細胞色素P450氧化酶

3、PNOD活性，分析了棉鈴蟲細胞色素P450氧化酶PNOD與對氰戊菊酯抗性的關系。 三、棉鈴蟲細胞色素P450基因克隆及mRNA差異表達　　采用cDNA末端快速擴增(RACE)，從棉鈴蟲氰戊菊酯高抗品系YGF脂肪體中克隆了三個新的細胞色素P450全長基因。結果表明，CYP9A12+CYP17v2(由于CYP9A12和CYP17v2的同源性為94﹪，半定量RT-PCR引物不能將兩基因分開)和CYP9A14在抗性品系YGF中均過量表

4、達，表達量分別是德國敏感品系SCD的10.2和7.9倍。特定的一個或幾個細胞色素P450基因的組成型過量表達可能導致棉鈴蟲對氰戊菊酯氧化解毒代謝的增強。 四、棉鈴蟲細胞色素P450基因異源表達　　本文選用酵母(Saccharomycescerevusiae)系統(tǒng)異源表達了CYP9A12、CYP9A14和CYP9A17v2基因，分析了這三個基因的異源表達產(chǎn)物對模式底物的氧化代謝作用(PNOD，ECOD和MROD)及對溴氰菊酯的離