蘄艾鞣酸的提取分離、藥理研究和結(jié)構(gòu)鑒定.pdf

1、艾葉（Artemisiae argyi）為菊科（Asteraceae）蒿屬(Artemisia)植物，主要分布于亞洲東部地區(qū)，普遍生長(zhǎng)于路旁荒野、草地。只要是向陽(yáng)而排水順暢的地方就能生長(zhǎng)，但以濕潤(rùn)肥沃的土壤生長(zhǎng)較好。本屬植物資源極其豐富，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)該屬植物具有明顯的抗氧化、抗癌等藥理作用，引起了眾多學(xué)者對(duì)該屬植物研究的興趣。其中對(duì)艾葉（Artemisiae argyi）的研究比較廣泛，從該植物中分離得到了大量化學(xué)成分，并探索出各種活

2、性能力。
　　 本文以中藥艾葉為研究對(duì)象，探索提取艾葉鞣酸的最佳工藝方法，并測(cè)定了不同地區(qū)艾葉中總鞣酸的含量，研究了蘄艾鞣酸清除自由基的能力﹑體外凝血作用﹑以及抗腫瘤等藥理作用，并分析了蘄艾中的有效成分，鑒定其化合物的結(jié)構(gòu)。具體工作如下：
　　 1.采用超聲波法提取艾葉中鞣酸，通過(guò)四因素三水平正交試驗(yàn)探討超聲波提取艾葉中鞣酸的最佳工藝條件，并對(duì)湖北蘄春、安徽霍山、山東鄄城、江西樟樹(shù)、河北安國(guó)五個(gè)產(chǎn)地艾葉中的總鞣酸含量進(jìn)行

3、分析比較，結(jié)果表明在超聲溫度60℃,超聲功率150W，超聲時(shí)間20min，固液比1:25，丙酮：水4:6的條件下鞣酸的提取率最高，其中湖北蘄春的艾葉總鞣酸含量達(dá)到13.29％，是所有研究品種中含量最高的，說(shuō)明蘄春作為艾葉的地道產(chǎn)地具有實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 2.通過(guò)Fenton反應(yīng)產(chǎn)生·OH，連苯三酚自氧化產(chǎn)生O2－?模型，采用紫外分光光度法，研究蘄艾總鞣酸體外清除自由基的能力，結(jié)果表明蘄艾總鞣酸在1.0～10.0mg/Ml范圍內(nèi)對(duì)羥

4、自由基和超氧陰離子自由基均具有清除作用，兩者均呈現(xiàn)明顯的量效關(guān)系， 最有效的清除濃度均為8.0mg/Ml，清除自由基能力均高于同等濃度的甘露醇，但低于同等濃度的抗壞血酸。
　　 3.通過(guò)MTT法在體外檢測(cè)不同濃度的蘄艾鞣酸對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2的細(xì)胞毒性作用，在此基礎(chǔ)上以大孔樹(shù)脂柱層析和薄層純化對(duì)蘄艾總鞣酸正丁醇部位提取分離，得到6個(gè)不同極性的鞣酸餾分，并通過(guò)MTT法比較不同極性的各提取物對(duì)肝癌細(xì)胞的增殖影響。其結(jié)果顯示蘄艾鞣酸

5、使體外培養(yǎng)的人肝癌細(xì)胞HepG2的凋亡細(xì)胞數(shù)增加，增值效率下降且呈濃度與時(shí)間的依賴(lài)關(guān)系。6個(gè)不同極性的提取物均具有抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，其中40％甲醇部位對(duì)肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用最強(qiáng)，是蘄艾鞣酸體外抗肝癌主要的活性部位。
　　 4.將蘄春艾葉中不同組分按照傳統(tǒng)方法進(jìn)行炮制或者提取分離，得到六個(gè)不同組分，分別為：5一叔丁基連苯三酚、艾炭、艾灰、艾葉揮發(fā)油、鞣酸和艾焦油，使用家兔對(duì)以上六個(gè)組分分別進(jìn)行了體外凝血試驗(yàn)，結(jié)果顯示蘄春艾