預(yù)防性應(yīng)用舒洛地特對(duì)大鼠心肌缺血-再灌注損傷心肌保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:
　　本研究旨在通過建立大鼠心肌缺血/再灌注在體動(dòng)物模型，觀察預(yù)防性應(yīng)用舒洛地特對(duì)大鼠心肌缺血/再灌注損傷過程中，其所發(fā)揮的心肌保護(hù)作用及可能的機(jī)制。
　　方法:
　　選擇健康、雄性、成年的SD大鼠，并隨機(jī)分為三組:假手術(shù)組（SO組）、缺血/再灌注組(I/R組)和舒洛地特組(VDF組)。制備SD大鼠心肌缺血/再灌注在體動(dòng)物模型，連接多導(dǎo)電生理儀記錄大鼠心電圖變化。其中，SO組大鼠僅在LAD下穿線，不予以結(jié)扎動(dòng)脈;

2、I/R組結(jié)扎大鼠心臟LAD30min，松開結(jié)扎線后，恢復(fù)心肌再灌注120min; VDF組大鼠在實(shí)驗(yàn)造模前予以舒洛地特15mg/kg.d灌胃，預(yù)防性用藥1周，實(shí)驗(yàn)時(shí)結(jié)扎LAD30min，隨后松開LAD結(jié)扎線，恢復(fù)心肌再灌注120min。所有大鼠完成再灌注后，再將每組大鼠隨機(jī)分為Ⅰ、Ⅱ兩個(gè)亞組。其中，所有Ⅰ組大鼠行EB/TTC染色，并測(cè)定心肌梗死面積百分比，即梗死區(qū)域面積(IS)/危險(xiǎn)區(qū)面積(ARS)×100％。Ⅱ組大鼠于實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)取血，

3、測(cè)定心肌心肌壞死標(biāo)記物CK-MB水平，以及炎癥因子TNF-α和IL-6，氧化應(yīng)激反應(yīng)指標(biāo)SOD活性及MDA等水平。
　　所有數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析。將雙側(cè)P值小于0.05定義為數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1.實(shí)驗(yàn)大鼠一般資料比較
　　所有實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物均為雄性SD大鼠，體重250-350g，年齡10-12周齡，健康清潔級(jí)，由河北北方學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。本實(shí)驗(yàn)共使用大鼠6

4、4只，4只大鼠在實(shí)驗(yàn)過程中死亡，死亡原因?yàn)樵炷＿^程中結(jié)扎LAD后發(fā)生心室顫動(dòng)。其中，I/R組有3只死亡，VDF組有1只死亡。余60只大鼠成功制作模型，每組20只，每組內(nèi)Ⅰ亞組和Ⅱ亞組內(nèi)分別各10只。
　　2.實(shí)驗(yàn)大鼠多導(dǎo)聯(lián)心電圖ST-T變化
　　實(shí)驗(yàn)前，大鼠安靜狀態(tài)下心電圖大致正常。當(dāng)成功結(jié)扎I/R組、VDF組大鼠LAD后，心電圖表現(xiàn)寬大畸形的QRS波群、ST段弓背向上樣抬高;恢復(fù)心肌再灌注后，心電圖出現(xiàn)T波回落，且ST段回

5、落程度＞50％。I/R組有3只出現(xiàn)心室顫動(dòng)隨后死亡，5只出現(xiàn)短暫室性心動(dòng)過速;VDF組有1只因心室顫動(dòng)死亡，4只出現(xiàn)短暫室性心動(dòng)過速。
　　3.實(shí)驗(yàn)大鼠心肌梗死面積比較
　　各組中的Ⅰ亞組大鼠行心肌組織EB/TTC染色，染色完畢后可見大鼠正常區(qū)域心肌呈藍(lán)色，缺血區(qū)域心肌呈暗紅色，梗死區(qū)域心肌呈蒼白色，對(duì)比顯著。使用麥克奧迪醫(yī)學(xué)圖像采集系統(tǒng)圖像分析軟件對(duì)染色心肌進(jìn)行分析，計(jì)算各組大鼠蒼白色梗死區(qū)域面積(IS)與心肌危險(xiǎn)區(qū)面積(

6、ARS)的比例(％)。結(jié)果顯示，預(yù)防性應(yīng)用舒洛地特的大鼠，其IS/ARS水平較I/R組顯著減小(58.23±8.06％ vs.45.16±7.91％，P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.實(shí)驗(yàn)大鼠心肌壞死標(biāo)記物比較
　　各組中的Ⅱ亞組大鼠行血液指標(biāo)測(cè)定。與SO組相比，I/R和VDF組大鼠血清CK-MB水平均顯著增高。而VDF組大鼠血清CK-MB指標(biāo)與I/R組相比降低(3284.89±302.41 vs.1912.45

7、±238.07 U/L，P＜0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　5.實(shí)驗(yàn)大鼠TNF-α及IL-6水平比較
　　SO組、I/R組、VDF組TNF-α水平分別為:37.52±13.90 Pg/ml、201.79±26.29 Pg/ml、144.13±.35.58 Pg/ml。同SO組相比，I/R組、VDF組血清TNF-α顯著升高(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;I/R組TNF-α高于VDF組，二者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05

8、)。三組的IL-6分別為:59.75±10.84Pg/ml、174.15±18.58Pg/ml、132.27±11.03Pg/ml，同SO組相比，I/R組、VDF組IL-6水平升高(P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;I/R組IL-6高于VDF組更明顯(P＜0.05），二者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　6.實(shí)驗(yàn)大鼠心肌SOD及MDA含量比較
　　三組SOD比較，I/R組SOD水平(69.80±17.23 U/mgProt)較SO

9、組(108.93±9.49U/mgProt)顯著降低(P＜0.05)，VDF組(90.76±10.19 U/mgProt)較I/R組顯著增加(P＜0.05），存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;I/R組MDA水平為7.35±1.38nmol/mgProt，較SO組水平(2.75±0.64 nmol/mgProt)顯著增加(P＜0.05)，而VDF組(4.04±0.97 nmol/mgProt)較I/R組顯著減少(P＜0.05)，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。