2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:為探討小間隙縫合法修復外周神經(jīng)損傷的最適間隙距離,本實驗采用聚乳酸膜小間隙縫合修復大鼠腓總神經(jīng)損傷,探討不同間隙縫合修復周圍神經(jīng)損傷的效果。
  方法:1.動物模型的建立:由南方醫(yī)科大學實驗動物中心提供SPF級健康雄性3月齡清潔級Sprague-Dawley(SD)大鼠40只,體重250~300g,用0.1%戊巴比妥鈉對大鼠進行腹腔注射麻醉,劑量為0.1ml/100g。待麻醉充分后,備皮,俯臥位固定于手術操作板上,絡合碘對右

2、下肢手術區(qū)進行消毒,鋪無菌洞巾。按小間隙縫合的間隙距離,實驗大鼠隨機分為4組,每組10只:
  嚴格按照無菌操作原則,取右膝后外側縱行切口,切開皮膚、皮下組織及筋膜,鈍性分離肌肉,在手術顯微鏡下,顯露腓總神經(jīng),用鋒利的顯微組織剪于距肌門近側5mm處橫斷腓總神經(jīng),根據(jù)腓總神經(jīng)兩斷端的形狀、紋理、營養(yǎng)血管的走行等特點將兩斷端準確對齊,防止神經(jīng)斷端扭轉。剪取約5mm×4mm的矩形聚乳酸膜,將其置于神經(jīng)斷端中間,分別保持神經(jīng)斷端有1mm、

3、2mm、3mm、0mm的間隙(分別記為E1組、E2組、E3組及N組),用7-0無損傷縫合線把神經(jīng)遠、近斷端的神經(jīng)外膜12點和6點位與聚乳酸膜兩邊縫合2針固定,將聚乳酸膜包繞神經(jīng)斷端成管狀,縫合聚乳酸膜游離緣,使聚乳酸膜呈一直徑與神經(jīng)直徑相當?shù)拿荛]套管,于聚乳酸膜套管兩端適當加1到3針將神經(jīng)外膜與聚乳酸套管縫合固定。用生理鹽水沖洗術野,徹底止血,將實驗神經(jīng)復還于原來的肌肉組織間隙中,逐層縫合肌膜、筋膜和皮膚。
  2.觀察指標:

4、r> ?、傩g后觀察實驗大鼠踝關節(jié)及足趾恢復背屈活動情況;
 ?、谏窠?jīng)電生理檢查:術后6周,用0.1%戊巴比妥鈉0.1ml/100g腹腔注射麻醉大鼠,待麻醉顯效滿意后,備皮,肢體妥善固定,用肌電圖儀測量大鼠再生神經(jīng)傳導速度;
 ?、凵窠?jīng)大體觀察:術后6周,暴露右側腓總神經(jīng),手術顯微鏡下觀察再生神經(jīng)解剖形態(tài);
  ④組織形態(tài)學觀察:縫合口部位取材,分離并切取腓總神經(jīng)小間隙段及其遠端5mm,4%多聚甲醛固定,石蠟包埋,行橫行

5、、縱行切片,常規(guī)行蘇木素-伊紅染色(HE染色)、Anti-S100 antibody-Astrocyte(標記許旺細胞)及Anti-200kD Neurofilament Heavy(標記神經(jīng)纖維)免疫組化反應,顯微鏡下觀察,采用Image-Pro Plus6.0圖像分析軟件測量神經(jīng)纖維數(shù);
  ⑤再生神經(jīng)超微結構觀察:分離并切取縫合口遠端約1mm長再生神經(jīng),戊二醛固定,醋酸鈾、枸櫞酸鉛染色,透射電鏡下觀察再生神經(jīng)超微結構;

6、>  ⑥測量肌肉濕重比:完整分離并切取大鼠雙側小腿前外側肌群,紗布吸干表面血液后立即用電子天平稱量肌肉濕重,精確到0.01g,計算濕重比(濕重比=手術側小腿前外側肌群濕重/非手術側小腿前外側肌群濕重)。
  3.統(tǒng)計學方法
  采用SPSS20.0軟件進行統(tǒng)計分析.數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示,多組樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析(One-Way ANOVA),兩兩比較采用LSD檢驗,P<0.05認為差異有統(tǒng)計學意義。
  結

7、果:①術后實驗大鼠踝關節(jié)及足趾恢復背屈活動情況:術后大鼠右小腿前外側肌群均癱瘓,呈垂足畸形,右踝背屈障礙,右足趾伸直障礙。0mm無間隙縫合組(N組)平均25日恢復踝關節(jié)及足趾背屈運動,而1、2、3mm小間隙縫合組(E1、E2、E3組)則分別為16日、22日及30日恢復踝關節(jié)及足趾背屈活動。
 ?、谏窠?jīng)電生理檢查(腓總神經(jīng)傳導速度):術后6周,右側腓總神經(jīng)傳導速度E1組>E2>N組>E3組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

8、 ?、凵窠?jīng)大體觀察:術后6周,暴露右側腓總神經(jīng),手術顯微鏡下觀察再生神經(jīng)解剖形態(tài)可見:聚乳酸膜已完全降解,未見神經(jīng)與周圍組織粘連。1mm小間隙縫合組(E1組)再生神經(jīng)較光滑,神經(jīng)遠段直徑基本正常;2mm小間隙縫合組(E2組)再生神經(jīng)欠光滑,神經(jīng)遠段直徑稍變細;3mm小間隙縫合組(E3組)再生神經(jīng)明顯膨大,神經(jīng)遠段明顯變細;0mm無間隙縫合組(N組)再生神經(jīng)膨大,神經(jīng)遠段變細。
 ?、芙M織形態(tài)學觀察:
  HE染色后鏡下觀察可

9、見:1mm小間隙縫合組(E1組)再生神經(jīng)纖維排列整齊有序,神經(jīng)纖維粗大,許旺細胞數(shù)量多,髓鞘清晰可見,無結締組織增生;2mm小間隙縫合組(E2組)再生神經(jīng)纖維排列較有序,神經(jīng)纖維較粗大,許旺細胞數(shù)量較多,髓鞘較清晰,可見結締組織增生;3mm小間隙縫合組(E3組)再生神經(jīng)呈膨脹性生長,神經(jīng)卷曲成團,排列明顯紊亂,遠段再生神經(jīng)數(shù)量最少,直徑最小,髓鞘模糊不清,結締組織增生較多;0mm無間隙縫合組(N組)再生神經(jīng)纖維較紊亂,神經(jīng)直徑較小,許旺

10、細胞數(shù)量少,髓鞘不明顯。
  Anti-S100 antibody-Astrocyte免疫組化觀察發(fā)現(xiàn):神經(jīng)形態(tài)觀察結果基本同HE染色所見,由于Anti-S100 antibody-Astrocyte抗體與許旺細胞特異性結合,故其免疫組化反應特異性顯示許旺細胞形態(tài)??梢奅1組許旺細胞數(shù)量多,髓鞘最厚,分層清晰整齊;E2組許旺細胞數(shù)量較多,髓鞘分層較清晰,髓鞘較厚;E3組許旺細胞數(shù)量最少,髓鞘最薄,未見明顯分層,髓鞘模糊不清;N組再

11、生神經(jīng)許旺細胞數(shù)量少,髓鞘較薄,髓鞘分層不明顯。
  Anti-200kD Neurofilament Heavy免疫組化反應觀察發(fā)現(xiàn):神經(jīng)形態(tài)觀察結果基本同HE染色所見,由于Anti-200kD Neurofilament Heavy抗體與神經(jīng)纖維特異性結合,故其免疫組化反應特異性顯示神經(jīng)纖維形態(tài)。可見E1組再生神經(jīng)纖維數(shù)量最多,排列最為整齊有序,再生神經(jīng)纖維直徑最粗;E2組再生神經(jīng)纖維數(shù)量較多,排列較有序,再生神經(jīng)纖維直徑較粗

12、;E3組再生神經(jīng)呈膨脹性生長,神經(jīng)卷曲成團,排列明顯紊亂,再生神經(jīng)數(shù)量最少,直徑最細; N組再生神經(jīng)纖維數(shù)量較少,排列較紊亂,可見部分神經(jīng)卷曲,再生神經(jīng)纖維直徑較細。采用Image-Pro Plus6.0圖像分析軟件測量神經(jīng)纖維數(shù)發(fā)現(xiàn):E1組>E2>N組>E3組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
 ?、菰偕窠?jīng)超微結構觀察:E1組再生神經(jīng)軸突橫截面呈圓形,再生神經(jīng)纖維數(shù)量最多,排列最為整齊有序,再生神經(jīng)纖維直徑最粗,髓鞘最厚,板

13、層呈同心圓狀致密、整齊包繞再生神經(jīng)軸突,髓鞘最為成熟;E2組再生神經(jīng)軸突橫截面基本呈圓形,偶有扭曲,再生神經(jīng)纖維數(shù)量較多,排列較為整齊,再生神經(jīng)纖維直徑較粗,髓鞘較厚,髓鞘板層較整齊、致密;E3組再生神經(jīng)軸突橫截面形狀明顯不規(guī)則,再生神經(jīng)纖維數(shù)量最少,排列紊亂,直徑最細,髓鞘最薄,髓鞘可見扭曲及畸形,板層排布極其紊亂、疏松,髓鞘模糊不清;N組再生神經(jīng)軸突橫截面形狀較不規(guī)則,再生神經(jīng)纖維數(shù)量較少,排列較紊亂,直徑較細,髓鞘較薄,髓鞘可見扭

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