精氨酸調(diào)控環(huán)江香豬胎兒發(fā)育的機(jī)制研究.pdf

1、本研究以環(huán)江香豬為試驗(yàn)動(dòng)物,通過飼養(yǎng)試驗(yàn)、屠宰試驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)室分析,分別研究了妊娠早期胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育狀況和日糧添加精氨酸對(duì)胎兒生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)控作用,并從生化參數(shù)、相關(guān)酶活性和關(guān)鍵基因表達(dá)等方面探討精氨酸對(duì)胎兒發(fā)育的調(diào)節(jié)機(jī)制,旨在為改善并最終解決豬的宮內(nèi)發(fā)育遲緩提供新思路。試驗(yàn)分為以下三大部分:
　　 試驗(yàn)一:環(huán)江香豬胎兒發(fā)育與生化參數(shù)關(guān)系研究
　　 選取體重35～40kg的后備環(huán)江母豬7頭,單圈飼養(yǎng),每圈1頭,配種后每天按配種

2、時(shí)體重的3％飼喂基礎(chǔ)日糧,配種第45d,頸靜脈放血處死并解剖,分別稱取胎兒、胎盤和子宮重量,每頭母豬各選取2只體重最大和最小的胎兒,采集其羊水、尿囊液和胎盤,-20℃保存,用于實(shí)驗(yàn)室分析。結(jié)果表明,與大體重胎兒相比,小體重胎兒平均個(gè)體重、胎盤重、子宮重和羊水+尿囊液體積分別低22.7％、61.8％、41.2％和39.2％(P＜0.05),羊水總膽固醇濃度高30.0％(P＜0.05),尿囊液絲氨酸、丙氨酸和酪氨酸濃度分別低57.6％、43

3、.5％和29.0％(P＜0.05),而賴氨酸、精氨酸和蘇氨酸濃度分別高25.2％、39.5％和113.7％(P＜0.05);胎盤總蛋白含量和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)活性分別高39.0％和70.2％(P＜0.05),結(jié)構(gòu)型一氧化氮合酶(cNOS)活性低22.2％(P＜0.05)。結(jié)果表明,妊娠早期胎兒體重大小與部分生理生化參數(shù)密切相關(guān)。
　　 試驗(yàn)二:精氨酸對(duì)環(huán)江香豬胎兒生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)控作用
　　 選取體重35～40k

4、g的環(huán)江后備母豬10頭,隨機(jī)分為2組,每組5頭。配種15 d后,試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中添加0.83％L-精氨酸,對(duì)照組添加1.71％L-丙氨酸(等氮對(duì)照)。配種后第45d,前腔靜脈采血,肝素抗凝,離心分離血漿;頸靜脈放血處死母豬,解剖母豬,記錄胎兒數(shù)量、重量和存活率,采集羊水、尿囊液,-20℃保存,用于實(shí)驗(yàn)室分析;采集母豬胎盤,液氮速凍后-70℃保存,用于Westen Blot分析。結(jié)果表明,試驗(yàn)組與對(duì)照組相比,胎兒平均個(gè)體重和黃體數(shù)分別提

5、高14.4％(P＜0.05)和6.0％(P＞0.05),胎盤粗脂肪含量降低14.7％(P＜0.05),血漿、羊水和尿囊液中精氨酸濃度分別提高18.3％、65％和79.1％(P＜0.05),鳥氨酸濃度分別提高49.2％、90.7％和92.3％(P＜0.05),脯氨酸濃度分別提高.25％、52.8％和80.3％(P＜0.05),尿囊液中賴氨酸濃度降低28.3％(P＜0.05):血漿和尿囊液中NO含量分別提高22.9％和66.3％(P＜0.0

6、5),胎盤中總一氧化氮合酶(TNOS)、iNOS和cNOS活性分別提高75.5％、61.7％和84.5％(P＜0.05);胎盤mTOR信號(hào)通路蛋白表達(dá)量比對(duì)照組提高15.66％(P＜0.05)。提示精氨酸可通過促進(jìn)胎盤NO的生成、提高胎盤蛋白質(zhì)的合成等途徑促進(jìn)胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育。
　　 試驗(yàn)三:精氨酸對(duì)環(huán)江香豬胎兒肝臟基因表達(dá)的調(diào)控作用
　　 試驗(yàn)動(dòng)物分組與處理同試驗(yàn)二。每頭母豬隨機(jī)選取1只體重最小的胎兒,采集肝臟,液氮速凍