青蒿素和白藜蘆醇協(xié)同抗腫瘤作用及其復(fù)方囊泡的制備研究.pdf

1、青蒿素作為有效的抗瘧藥物，主要機(jī)制是通過(guò)與瘧原蟲(chóng)中的高鐵成分結(jié)合后，發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生可以破壞細(xì)胞膜的“自由基”，從而使單細(xì)胞瘧原蟲(chóng)死亡。癌癥細(xì)胞的分裂過(guò)程中復(fù)制DNA需要大量鐵質(zhì)，所以癌細(xì)胞的鐵質(zhì)含量要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高出正常細(xì)胞，因此引入青蒿素，可有選擇性地殺死癌細(xì)胞。白黎蘆醇是一種多酚化合物，研究發(fā)現(xiàn)其在腫瘤的啟動(dòng)、發(fā)生和發(fā)展三個(gè)階段均發(fā)揮強(qiáng)大的抗腫瘤作用其主要機(jī)制是誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡，抑制DNA合成，抑制增進(jìn)作用，抑制環(huán)氧合酶(COX)，抑制過(guò)氧

2、化氫酶等。但是青蒿素和白藜蘆醇同時(shí)作為中藥單體兩者的IC50（半數(shù)抑制濃度）均非常高，臨床用量較大。故考慮將兩藥合用，利用青蒿素與白藜蘆醇抗腫瘤機(jī)制的互補(bǔ)性，兩藥合用來(lái)增強(qiáng)其抗腫瘤效果，同時(shí)由于兩藥的低毒性，可大大降低一般抗腫瘤藥物所帶來(lái)的機(jī)體毒性，有助于提高患者臨床護(hù)理。除此之外，白藜蘆醇和青蒿素是脂溶性藥物，水溶性差，口服吸收差，且沒(méi)有靶向性，代謝速率過(guò)快，體內(nèi)代謝不穩(wěn)定，故臨床應(yīng)用受到很大限制。非離子表面活性劑囊泡（類(lèi)脂質(zhì)體）是一

3、種有效的藥物輸送載體，具有類(lèi)似細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，它具有與脂質(zhì)體一樣有一定的的靶向性能，但較穩(wěn)定，并且可以改變被包封藥物在體內(nèi)的分布情況，它具有多方面的優(yōu)點(diǎn)如靶向、長(zhǎng)效以及增加藥物穩(wěn)定性等。因此，試圖把兩藥合在一起制成復(fù)方囊泡，以提高藥物的生物利用度，發(fā)揮更好的抗腫瘤效果。
　　通過(guò)體外HeLa和HepG2腫瘤細(xì)胞模型，MTT實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)合用青蒿素和白藜蘆醇可明顯提高藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷率，兩藥的IC50均大大的降低，另外采用CI值和等效線(xiàn)法

4、發(fā)現(xiàn)，青蒿素和白藜蘆醇對(duì)HeLa和HepG2產(chǎn)生協(xié)同抗癌作用。進(jìn)一步利用AO染色顯微鏡觀察和流式細(xì)胞法檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞凋亡的作用，實(shí)驗(yàn)表明兩藥合用對(duì)HeLa細(xì)胞的早晚期細(xì)胞凋亡均有更好的誘導(dǎo)作用。因此，誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡是兩藥合用抗腫瘤的作用機(jī)制之一。為了考察兩藥合用對(duì)腫瘤細(xì)胞遷移的作用，采用細(xì)胞劃痕法，對(duì)細(xì)胞的遷移率進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果表明，兩藥合用對(duì)HeLa細(xì)胞遷移的抑制作用要明顯優(yōu)于單獨(dú)用藥組。除此之外，考察了兩藥對(duì)Hela細(xì)胞內(nèi)ROS的影

5、響，通過(guò)對(duì)對(duì)照組和單藥組的顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的發(fā)光亮度要明顯弱于合用組可認(rèn)為對(duì)照組和單藥組的ROS產(chǎn)量明顯低于合用組，說(shuō)明兩藥合用能夠有效促進(jìn)癌細(xì)胞內(nèi)ROS產(chǎn)生，從而進(jìn)一步導(dǎo)致了Hela細(xì)胞的死亡。
　　在兩藥復(fù)方囊泡的制備實(shí)驗(yàn)中，采用薄膜分散法制備復(fù)方囊泡，通過(guò)對(duì)囊泡的包封率、δ電位和粒徑的檢測(cè)，對(duì)處方進(jìn)行了進(jìn)一步的優(yōu)化。通過(guò)最優(yōu)處方制備的復(fù)方囊泡中青蒿素和白藜蘆醇的包封率75.8％和61.5％。同時(shí)體外釋放度實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)，兩藥從

6、囊泡中的釋放是一個(gè)緩慢的過(guò)程，表明藥物可以在釋放介質(zhì)中保持更好的的穩(wěn)定性，因此復(fù)方囊泡可以達(dá)到一個(gè)更好的傳遞效果，滿(mǎn)足有效藥物傳遞的要求。
　　將中藥單體青蒿素和白藜蘆醇合用于抗腫瘤治療中，具有低毒性，安全性高的優(yōu)點(diǎn)，可以明顯提高抗腫瘤效果。同時(shí)將兩種藥物用囊泡包合后能明顯改善藥物自身的水溶性低，藥理作用不明顯等缺點(diǎn)，增加藥物生物利用度和穩(wěn)定性，可以為中藥單體作為抗腫瘤藥物方面的應(yīng)用提供一定的價(jià)值。但是，目前的研究還不夠全面，更深