白藜蘆醇及聯(lián)苯二酚選擇性抗腫瘤作用的初步研究.pdf

1、目的：探討白藜蘆醇及聯(lián)苯二酚能夠選擇性抗腫瘤的藥物濃度及機(jī)制。
　　方法：用不同濃度(0~60μM)的白藜蘆醇(Resveratrol, RES)及聯(lián)苯二酚(4,4’-Dihydroxybiphenyl, DID)分別作用于不同的肺癌細(xì)胞、鼻咽癌細(xì)胞和人正常支氣管上皮細(xì)胞。用CCK8法檢測(cè)RES、DID對(duì)腫瘤細(xì)胞活力的影響，初步篩選能抑制腫瘤細(xì)胞增殖而對(duì)正常細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)抑制影響的藥物濃度范圍；用平皿克隆法檢測(cè)在選擇性抗腫瘤藥物濃度作

2、用下不同腫瘤細(xì)胞克隆集落生成的差異；用Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度的RES、DID對(duì)腫瘤細(xì)胞遷移的影響；通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)(FCM)分析不同濃度的RES、DID對(duì)腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞的細(xì)胞周期影響，同時(shí)DNA Ladder法觀察不同濃度、時(shí)間的RES、DID對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡影響；Western blot分析 CAV-1、NQO1、HSP90、ATP、PCNA是否可以作為RES、DID選擇性抗腫瘤作用下療效的評(píng)價(jià)指標(biāo)。
　　結(jié)果：CC

3、K8法結(jié)果顯示RES、DID在(7.5~30μM)范圍內(nèi)能夠抑制不同的腫瘤細(xì)胞的增殖，且并不影響正常人支氣管上皮細(xì)胞16HBE生長(zhǎng)。平皿克隆、Trans well實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了(10~30μM)的RES、DID能明顯抑制腫瘤細(xì)胞克隆集落數(shù)的生成和細(xì)胞遷移。同時(shí) FCM檢測(cè)到(10~30μM)的RES、DID能促使腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期阻滯于S期但并不影響正常細(xì)胞的細(xì)胞周期運(yùn)行。DNA ladder實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示50μM的RES、DID處

4、理后的CNE-2細(xì)胞未見(jiàn)DNA斷裂現(xiàn)象，但較大劑量(100μM以上)、藥物作用時(shí)間長(zhǎng)(24h以上)的RES、DID能促使 CNE-2細(xì)胞 DNA凋亡。Western-blot檢測(cè)結(jié)果顯示，在(10~30μM)的RES與DID作用腫瘤細(xì)胞可以濃度依賴性下調(diào)PCNA、HSP90、ATP的表達(dá)，上調(diào)CAV-1、NQO1的表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　1.30μM的RES、DID能夠阻滯肺癌與鼻咽癌細(xì)胞的細(xì)胞周期于S期，能抑制其增殖和遷移