野百合堿致肺動脈高壓中細胞自噬分子的表達和功能.pdf

1、目的：
　　觀察細胞自噬相關蛋白在肺動脈高壓發(fā)病過程中的動態(tài)變化，探討細胞自噬在肺動脈高壓發(fā)病中的可能作用。
　　方法：
　　建立野百合堿肺動脈高壓動物模型：SD大鼠以2％MCT按60mg/kg劑量一次性腹腔注射，正常飼養(yǎng)3wk。并測定下列指標：
　?、儆倚氖沂湛s壓（RVSP）；
　?、贖E染色觀察肺動脈血管形態(tài)；
　　③用實時定量 PCR的方法檢測細胞自噬標志性基因LC3和p62的mRNA在模型組的

2、動態(tài)表達；
　?、芊謩e用免疫組織化學和Western blot方法測定細胞自噬相關蛋白LC3和p62在肺動脈高壓模型組織中的動態(tài)變化.。
　　結果：
　　與正常對照組（CON組）相比
　?、倌Ｐ徒M(MCT組)的RVSP隨著時間的延長而逐漸增高（P<0.05），證明PAH模型建造成功；
　?、贖E染色見肺動脈平滑肌出現(xiàn)不同程度的增生，管壁厚度增加，管腔逐漸狹窄并伴有不同程度的損傷甚至斷裂；肺血管損傷明顯，內皮

3、細胞變性腫脹，突向血管腔內，甚至壞死脫落；
　?、跰CT組LC3的mRNA表達相比對照組呈遞增趨勢，而p62的mRNA表達則隨時間延長而下降；
　　④不同時間點模型組LC3的平均灰度值均明顯升高，p62的平均灰度值均下降；模型組的LC3蛋白過表達，而p62蛋白呈現(xiàn)低表達。
　　結論：
　　野百合堿可以成功誘導出SD大鼠肺動脈高壓模型；自噬相關因子LC3，p62在PAH發(fā)病中的動態(tài)表達提示自噬可能參與了PAH的發(fā)病