大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)為腎臟系膜細(xì)胞樣細(xì)胞的實驗研究.pdf

1、研究背景和目的：腎臟系膜是腎小球毛細(xì)血管袢之間重要的支持成分，由系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)組成。系膜細(xì)胞對保持毛細(xì)血管袢的開放并維持有效的。腎臟灌注和濾過有重要意義。系膜細(xì)胞的損傷可見于各種臨床腎臟疾病，并將會導(dǎo)致一系列病理變化，最終導(dǎo)致腎功能的衰竭。 近年的研究顯示骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs)具有跨系分化成非造血細(xì)胞的能力，包括成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、心肌細(xì)胞、肝細(xì)

2、胞、神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細(xì)胞等。而既往研究表明，骨髓來源的細(xì)胞可以補充腎小球系膜細(xì)胞，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在體內(nèi)和體外均有分化成為腎小球系膜細(xì)胞的潛能，從而成為腎損傷組織修復(fù)的細(xì)胞來源。 在腎小球毛細(xì)血管袢發(fā)育過程中，許多生長因子與細(xì)胞因子參與其中并發(fā)揮重要作用。其中血小板源生長因子(platelet-derivedgrowthfactor，PDGF)與系膜細(xì)胞的發(fā)育有確切相關(guān)證據(jù)，PDGFB-/-或PDGF受體(platelet-de

3、rivedgrowthfactorreceptor，PDGFR)β-/-動物模型中，腎小球毛細(xì)血管袢不發(fā)育，且缺乏系膜細(xì)胞。提示PDGFB/PDGFRβ對系膜細(xì)胞的招募具有重要意義。目前尚未見到BMSCs向腎臟系膜細(xì)胞分化機制研究的相關(guān)報道，推測可能是通過干細(xì)胞表面的PDGFR的介導(dǎo)，激活細(xì)胞內(nèi)各種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及分子，產(chǎn)生定向誘導(dǎo)分化作用。本研究選用的絲裂原活化蛋白激酶/細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶(mitogen-activatedprot

4、einkinase/external-signalregulatedkinase，MAPK/ERK)途徑參與了胚胎發(fā)育、細(xì)胞分化、轉(zhuǎn)化和增殖的過程。且據(jù)目前資料顯示此信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑介導(dǎo)了BMSCs向其他種類細(xì)胞的定向誘導(dǎo)分化。本研究旨在證實PDGF-BB體外誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向腎臟系膜細(xì)胞分化的潛能，并初步探討MAPK/ERK途徑在此誘導(dǎo)分化過程中發(fā)揮的作用。 實驗方法： 1、利用貼壁法獲取SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，